rhBMP-4與rhIGF-Ⅰ聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞增殖及分化的影響.pdf

1、牙周組織再生的關(guān)鍵是剩余牙周膜細(xì)胞的增殖、遷移和向成骨細(xì)胞及成牙骨質(zhì)細(xì)胞的分化。研究表明，骨形成蛋白-4(BMP-4)屬于TGF-β家族，不僅在骨形成時(shí)誘導(dǎo)未分化間充質(zhì)細(xì)胞的有絲分裂，增加骨細(xì)胞中堿性磷酸酶的活性，而且直接參與調(diào)控牙周膜細(xì)胞的遷移、附著、增殖和分化等生物學(xué)活動(dòng)。胰島素樣生長因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)可促進(jìn)牙周膜成纖維細(xì)胞的趨化、有絲分裂和蛋白質(zhì)的合成。為初步探討外源性生長因子在牙周組織再生中的應(yīng)用潛能，本實(shí)驗(yàn)在體外分離培養(yǎng)牙

2、周膜成纖維細(xì)胞(PDLFs)并觀察其成骨的表型特征；探索rhBMP-4及rhIGF-Ⅰ單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞增殖及分化能力影響。本研究分為以下部分： 一.rhBMP-4、rhIGF-Ⅰ對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖和分化影響的濃度效應(yīng) 方法：體外分離培養(yǎng)人牙周膜成纖維細(xì)胞，將人牙周膜成纖維細(xì)胞與不同濃度的rhBMP-4、rhlGF-Ⅰ共同培養(yǎng)5d，用MTT法測(cè)定人牙周膜成纖維細(xì)胞增殖情況，用堿性磷酸酶試劑盒檢測(cè)人

3、牙周膜成纖維細(xì)胞堿性磷酸酶的活性。 結(jié)果：第3d，rhBMP-4與rhlGF-Ⅰ對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞的生長增殖能力及堿性磷酸酶活性的影響與對(duì)照組比較均有顯著性差異，且最佳濃度均為10ng/ml。 結(jié)論：rhBMP-4與rhlGF-Ⅰ均對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞生長增殖及分化有促進(jìn)作用。 二.rhBMP-4與rhIGF-Ⅰ聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞增殖及分化的影響 方法：將人牙周膜成纖維細(xì)胞分別與10 ng/m

4、l rhBMP-4、10ng/ml rhlGF-Ⅰ、10ng/ml rhBMP-4+10ng/ml rhIGF-Ⅰ及無血清DMEM共同培養(yǎng)3d，用MTT法測(cè)定人牙周膜成纖維細(xì)胞增殖情況，用堿性磷酸酶試劑盒檢測(cè)人牙周膜成纖維細(xì)胞堿性磷酸酶的活性，用羥脯氨酸試劑盒檢測(cè)細(xì)胞分泌Ⅰ型膠原的量。 結(jié)果：第3d，10ng/ml rhBMP-4+10ng/ml rhIGF-Ⅰ組，人牙周膜成纖維細(xì)胞的生長增殖能力最強(qiáng)，并與其它三組比較有顯著性差