豬源多殺性巴氏桿菌的分型及其毒力特性研究.pdf

1、近年來，豬多殺性巴氏桿菌病在我國廣泛流行并致病，已成為嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要細(xì)菌性病原菌之一。本研究對(duì)57株豬源多殺性巴氏桿菌進(jìn)行了莢膜分型、基因分型和小鼠毒力試驗(yàn)，并對(duì)1株弱毒菌株進(jìn)行了仔豬免疫保護(hù)試驗(yàn)，主要得到以下研究結(jié)果：
　　1.對(duì)實(shí)驗(yàn)室保存的57株多殺性巴氏桿菌進(jìn)行了莢膜分型（Carter分型）、基因分型（Harper分型）。Carter分型共鑒定出莢膜D型32株，占56.14％；莢膜A型25株，占43.86%；未檢測

2、到B、E和F型。Harper分型共鑒定出L6型42株，占73.68%；L3型13株，占22.80%；另外還有L1型1株，L5型1株；未檢測到 L2、L4、L7和L8型。這表明我國豬群中多殺性巴氏桿菌以Carter A型和D型為主；Harper基因型以L6型和L3型為主，還有少量L1型和L5型。Carter分型與Harper分型的關(guān)系為：所有32株Carter D型均為Harper L6型，25株Carter A型包括Harper L3型

3、13株、L6型10株、L1型1株和L5型1株。
　　2.小鼠毒力試驗(yàn)結(jié)果表明，25株Carter A型菌株毒力普遍較強(qiáng)，其LD50介于17～2.1×105 CFU之間，其中毒力最強(qiáng)的為PM-5，其LD50不超過9 CFU；32株Carter D型菌株毒力普遍較弱，其LD50介于2.0×104～4.8×107 CFU之間，其中毒力最強(qiáng)的為PM-15，其LD50為2.0×104 CFU。按Harper基因分型進(jìn)行毒力比較，Carter

4、 A型的Harper L6型＞Carter A型的Harper L3型＞Carter D型的Harper L6型。在D型（Harper L6型）菌株中發(fā)現(xiàn)2株弱毒菌株P(guān)M-18和PM-37，其LD50分別為＞4.8×107 CFU和5.3×104 CFU。同時(shí)發(fā)現(xiàn)1株D型（Harper L6型）產(chǎn)毒素巴氏桿菌弱毒菌株TPM9，其LD50為＞2.6×106 CFU。這3株菌株能否作為天然弱毒疫苗菌株值得進(jìn)一步研究。
　　3.本研究評(píng)

5、估了PM-18弱毒菌株作為天然弱毒疫苗菌株的安全性。小鼠安全性試驗(yàn)結(jié)果表明，高劑量接種組小鼠（9.6×107 CFU/只）出現(xiàn)了暫時(shí)的精神沉郁，食欲減退等現(xiàn)象，但24小時(shí)內(nèi)均恢復(fù)正常。低劑量組（9.6×105 CFU/只）沒有出現(xiàn)明顯的臨床癥狀和病理變化。仔豬一次單劑量接種的安全性試驗(yàn)結(jié)果表明，大劑量肌肉注射仔豬（6.2×109 CFU/頭）后，均不出現(xiàn)明顯的臨床癥狀和病理變化。仔豬單劑量重復(fù)接種的安全性試驗(yàn)結(jié)果表明，2次大劑量肌肉注射

6、仔豬（1.2×1010 CFU/頭）后，均不出現(xiàn)明顯的臨床癥狀和病理變化。
　　4.以PM-18弱毒菌株2次接種22-25日齡仔豬（間隔21日，4.4×109 CFU/頭/次），二免后14日使用高低D型強(qiáng)毒菌株P(guān)M-15菌液進(jìn)行腹腔攻毒，結(jié)果表明PM-18免疫組中有1頭仔豬出現(xiàn)典型的發(fā)病癥狀并死亡，保護(hù)率為4/5；空白對(duì)照組仔豬全部出現(xiàn)嚴(yán)重的發(fā)病癥狀并全部死亡。死亡豬剖檢均具有典型巴氏桿菌病的病理變化。ELISA抗體檢測結(jié)果表明，