Ad-hTERTp-HSV-TK-GCV系統(tǒng)對(duì)肝癌腹水抑制效應(yīng)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：?jiǎn)渭儼捳畈《拘剀占っ富蛑委熓且环N應(yīng)用最廣泛的基因治療策略，本研究探討由人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)單純皰疹病毒胸腺激酶基因的重組腺病毒聯(lián)合更昔洛韋對(duì)小鼠肝癌腹腔種植腹水生成的影響。
　　 方法：⑴將hTERT啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)單純皰疹病毒胸腺激酶基因的重組腺病毒進(jìn)行擴(kuò)增、純化及滴度測(cè)定；⑵將腹腔內(nèi)接種H22細(xì)胞的小鼠隨機(jī)分為Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV組、Ad-hTERTp-HSV-TK組、GCV組和空白對(duì)照組，48h

2、后給與相應(yīng)的治療，并觀察各組小鼠體重、腹圍、腹水量、生存時(shí)間，以及對(duì)體內(nèi)臟器的影響；⑶流式細(xì)胞儀測(cè)定腹水腫瘤細(xì)胞凋亡百分率；⑷透射電鏡觀察腹水腫瘤細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。
　　 結(jié)果：①將病毒液擴(kuò)增、純化后，用50％組織培養(yǎng)感染劑量法(TCID50)測(cè)定病毒滴度為1.5×1010pfu/ml；②經(jīng)過(guò)Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV治療的小鼠，顯示出明顯的腹水抑制作用，體重和腹圍增長(zhǎng)緩慢，其腹水量顯著低于各對(duì)照組(P＜0.01)

3、，生存時(shí)間延長(zhǎng)(P＜0.01)，并且對(duì)體內(nèi)臟器無(wú)明顯毒副作用。③Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV組腹水腫瘤細(xì)胞凋亡率為(27.12±2.12)％，明顯高于其他各對(duì)照組(P＜0.01)。④電鏡下觀察Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV組的腹水腫瘤細(xì)胞呈凋亡改變。
　　 結(jié)論：Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV系統(tǒng)可通過(guò)誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡而抑制小鼠腹水生成，并延長(zhǎng)生存期，是一種安全可行的治療方法，對(duì)其臨床應(yīng)用具有理論