嬰兒雙歧桿菌介導HSV-TK-GCV治療大鼠膀胱癌的實驗研究.pdf

1、目的:評價嬰兒雙歧桿菌(BI)介導單純皰疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)/更昔洛韋(GCV)自殺基因治療系統(tǒng)對SD大鼠膀胱癌的治療效果，探討其誘導大鼠膀胱癌組織細胞的凋亡及對大鼠膀胱癌組織Fas/FasL mRNA和蛋白表達的影響。
　　方法:
　　(1)構建重組質粒pGEX-TK。
　　(2)構建嬰兒雙歧桿菌介導HSV-TK/GCV自殺基因治療系統(tǒng)。
　　(3) N-甲基亞硝基脲(MNU)膀胱灌注法誘導建立大鼠膀

2、胱腫瘤模型，并隨機分為生理鹽水/GCV對照組（生理鹽水組）、BI-pGEX-5X-1/GCV組（空質粒組）和BI-pGEX-TK/GCV治療組（重組質粒組）。分別將生理鹽水、BI-pGEX-5X-1、BI-pGEX-TK經(jīng)尾靜脈注射到各組荷瘤大鼠體內，聯(lián)合腹腔注射GCV，療程共4周。
　　(4)治療4周后，稱取各組膀胱癌組織重量;TUNEL法檢測各組腫瘤組織凋亡;RT-PCR、蛋白質印跡法(WB)檢測各組腫瘤組織Fas/FasL

3、mRNA及蛋白表達水平。
　　結果:
　　(1)成功構建重組質粒pGEX-TK。
　　(2)成功構建嬰兒雙歧桿菌介導HSV-TK/GCV自殺基因治療系統(tǒng)。
　　(3)重組質粒組荷瘤大鼠膀胱重量與空質粒組及生理鹽水組相比明顯降低，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　(4) TUNEL法檢測發(fā)現(xiàn)各組均出現(xiàn)不同程度的腫瘤細胞凋亡，與空質粒組及生理鹽水組相比，重組質粒組凋亡最為顯著(P＜0.01)。
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