大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染及其對腸瘺瘺口的影響.pdf

1、目的：腸瘺是一種嚴(yán)重的術(shù)后并發(fā)癥且死亡率高。主要表現(xiàn)為：瘺口形成與腸內(nèi)容物漏出、感染、營養(yǎng)不良、水電解質(zhì)和酸堿平衡紊亂以及多器官功能障礙等。營養(yǎng)支持、抗感染、減少腸液分泌、封堵瘺管、維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定、促進(jìn)瘺管愈合以及選擇性手術(shù)治療等綜合措施，可以提高治愈率。血紅素加氧酶-I(HO-1)也稱為熱休克蛋白32，是血紅素降解過程中的限速酶，它可以降解衰老或破損紅細(xì)胞釋放出的血紅素，生成膽綠素、膽紅素、一氧化碳(CO)和鐵蛋白。大量事實證明，HO

2、-1在保持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)方面能起到極其重要的作用，可以減輕由免疫介導(dǎo)、氧化應(yīng)激、炎性細(xì)胞浸潤導(dǎo)致的組織損傷。腺相關(guān)病毒(adeno-associated virus，AAV)是安全有效的基因載體，且有外源基因可以長期穩(wěn)定表達(dá)，分裂期細(xì)胞和靜止期細(xì)胞均能被感染等優(yōu)點，還能將基因轉(zhuǎn)入非周期(noncyling)腫瘤細(xì)胞。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞屬于多潛能干細(xì)胞，分化潛能更廣，具有自我更新能力及多向分化能力。能在合適的分化條件下不僅可以分化為成骨細(xì)胞、脂肪

3、細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、肌肉細(xì)胞等中胚層細(xì)胞，而且可以分化為外胚層和內(nèi)胚層的細(xì)胞。它成為多種組織修復(fù)的種子細(xì)胞與基因治療的良好載體。在嚴(yán)重的組織缺血和損傷的病例中可觀察到骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷徙至損傷部位，并分泌生物活性因子，促進(jìn)修復(fù)與再生。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以通過骨髓遷徙或體外擴(kuò)增后直接或全身注射到達(dá)損傷部位，抑制疤痕與凋亡，促進(jìn)血管生成及祖細(xì)胞分裂分化，有利于損傷的愈合。本文探討轉(zhuǎn)染HO-1基因的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對大鼠腸瘺模型的影響。

4、>　　 方法：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離與培養(yǎng)。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞通過腺相關(guān)病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染HO-1基因。以Wistar大鼠建立腸瘺模型，實驗動物隨機分為實驗組（術(shù)后24小時造瘺口注射1×106個轉(zhuǎn)染目的基因的骨髓干細(xì)胞），，對照組（術(shù)后24小時造瘺口注射生理鹽水lOOul）。移植70天后觀察瘺口愈合情況。
　　 結(jié)果：實驗組瘺口愈合明顯快于對照組。
　　 結(jié)論：轉(zhuǎn)染H0-1基因的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植有利于大鼠腸瘺模型瘺口的愈合