樹突狀細胞在多柔比星誘導的大鼠腎纖維化模型中的作用.pdf

1、背景與目的：腎纖維化是各種病因所致的慢性腎臟病(Chronic renal disease,CKD)走向終末期腎臟病(End stage renal disease,ESRD)的共同途徑,以腎小球硬化及腎小管間質(zhì)纖維化為主要病理特征。研究腎纖維化早期階段的發(fā)生機制及主導因素,對探索防治腎纖維化的有效手段具有重要意義。盡管人們早已認識到樹突狀細胞(dendritic cell,DC)在誘導和調(diào)節(jié)適應性免疫過程中起關(guān)鍵作用,但因其極易損壞而

2、致探測和分離腎組織內(nèi)DC在技術(shù)上難度很大,直到1994年才找到腎組織內(nèi)存在DC的確鑿證據(jù),而目前仍缺乏DC在慢性腎纖維化過程中作用的研究資料。本研究以多柔比星誘導腎纖維化大鼠為對象,探討DC在慢性腎纖維化發(fā)生發(fā)展過程中的作用。
　　方法：SD大鼠52只適應性飼養(yǎng)1周后隨機分為對照組(n=20)和模型組(n=32)。于第1、2周第1天給予多柔比星(4 mg/kg)尾靜脈注射建立腎纖維化模型,對照組給予等量生理鹽水,首次給藥后第4、7

3、、10、13周末收集血、尿標本,測定血甘油三脂、總膽固醇和白蛋白及24 h尿蛋白排泄率;應用Masson染色觀察腎臟組織形態(tài)學變化,并計算腎小球硬化指數(shù)(glomerulosclerosis index,GSI)及腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)(tubulointerstitial index,TII)評估腎臟損害程度;應用免疫組化觀察DC生物學標志(OX62)的變化;應用Western blot技術(shù)檢測腎組織肝細胞生長因子(HGF)的表達。

4、>　　結(jié)果：1.各組大鼠血甘油三酯、總膽固醇及血清白蛋白水平變化與對照組相比,第7周末模型組血甘油三酯水平升高(2.57±1.19 vs0.76±0.11,P<0.01)、血總膽固醇水平升高(6.79±1.47 vs1.29±0.27,P<0.01),血清白蛋白水平明顯降低(21.41±2.11vs34.64±0.96,P<0.01)。
　　2.各組大鼠24 h尿蛋白排泄率的變化與對照組相比,第7周末模型組24 h尿蛋白排出率明顯

5、增加(568±102 vs21±6,P<0.01),且隨實驗時間呈逐漸上升趨勢。
　　3.各組大鼠腎臟病理形態(tài)學改變光鏡下觀察,模型組腎小球系膜基質(zhì)明顯增多,腎小管多灶性萎縮和擴張,管腔內(nèi)可見蛋白管型,并隨時間延長逐漸加重。GSI及TII隨時間延長逐漸升高(P<0.05)。
　　4.DC的觀察模型組在第7周時觀察到OX62陽性細胞,呈圓形、橢圓形、星狀或不規(guī)則形態(tài),主要分布于腎小管、腎間質(zhì)和腎血管,以腎間質(zhì)最為明顯,腎小球系