中國(guó)弓形蟲(chóng)不同分離株、RH株及其突變體同源性和差異研究.pdf

1、目的建立一種運(yùn)用PCR-RFLP簡(jiǎn)單地對(duì)弓形蟲(chóng)不同分離株分型鑒定的方法.也采用PFGE技術(shù)分析中國(guó)弓形蟲(chóng)不同分離株、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)毒力株RH株及其突變體的分子核型,結(jié)合基因定位,從染色體DNA數(shù)目、大小及DNA電泳遷移等特征上了解弓形蟲(chóng)不同分離株的同源性與差異;比較具有免疫保護(hù)作用的紫外線減毒和熱殺死弓形蟲(chóng)RH株與正常RH株之間的染色體DNA差別,揭示蟲(chóng)株毒力差異的遺傳基礎(chǔ).該研究旨在為弓形蟲(chóng)的毒力研究、分子流行病學(xué)、弓形蟲(chóng)病的防治等提供科學(xué)

2、的理論依據(jù).結(jié)論該實(shí)驗(yàn)中采用的蟲(chóng)株繁殖和純化方法獲得了較好純度的弓形蟲(chóng)蟲(chóng)體.PCR法從基因組中成功擴(kuò)增探針基因并用DIG標(biāo)記為探針,探針有較好的敏感度和特異性.PCR-RFLP的多態(tài)性把5個(gè)弓形蟲(chóng)分離株分為兩種酶切譜類型.中國(guó)弓形蟲(chóng)分離株、RH株及其突變體之間的PFGE電泳核型大部分相似,這表明不同分離株存在一定的同源性,但PFGE同時(shí)顯示不同分離株之間染色體DNA大小的多態(tài)性,它可能是弓形蟲(chóng)不同分離株毒力差異的基礎(chǔ).基因定位分析也表明