甲巰咪唑分子印跡仿生酶聯(lián)免疫分析方法建立.pdf

1、近年來，動物性食品的安全性問題日益被世界所重視，由于我國的食品安全體系尚在建立中，一些不法生產(chǎn)者和經(jīng)營企業(yè)在飼料中非法使用國家禁止或者不按照規(guī)定使用添加劑，有些甚至濫用導(dǎo)致畜產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)的殘留增加、嚴重超標等現(xiàn)象突出，嚴重影響了人們的身體健康。甲巰咪唑具有增進蛋白質(zhì)代謝的作用從而被非法地作為飼料添加劑使用，食用殘留有甲巰咪唑的動物性食品后會在人體內(nèi)蓄積，對人體產(chǎn)生毒副作用。已有的文獻中尚未發(fā)現(xiàn)用分子印跡技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)相結(jié)合

2、來檢測甲巰咪唑的殘留量的報道，本論文基于分子印跡技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附法，針對動物性食品中的甲巰咪唑殘留的檢測，建立了價格低廉、快速、準確的檢測方法。
　　 本文采用本體聚合技術(shù)，以甲巰咪唑為模板分子，甲基丙烯酸為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，在96孔酶標板上直接紫外引發(fā)聚合制備了對甲巰咪唑具有選擇識別能力的分子印跡聚合物，且對聚合反應(yīng)條件進行了詳細討論;同時對印跡聚合物的平衡結(jié)合，吸附動力學(xué)和選擇性能力進行了考察。實驗結(jié)

3、果表明，合成的聚合物對甲巰咪唑具有選擇性高、傳質(zhì)速度和結(jié)合平衡速度快等諸多優(yōu)點。印跡聚合物的飽和吸附容量Qmax為1.51μg well-1;在動力學(xué)實驗中，吸附約40 min即可達到吸附平衡。
　　 以該印跡膜作為仿生抗體，優(yōu)化酶聯(lián)免疫分析條件，建立了直接競爭仿生酶聯(lián)免疫分析方法(BELISA)。該方法對甲巰咪唑具有很高的選擇性，對2-巰基咪唑等兩種結(jié)構(gòu)類似物的交叉反應(yīng)率為1.1％-1.3％，靈敏度和最低檢出限分別為70±4μ

4、g L-1和0.9±0.04μg L-1。
　　 為驗證所建立方法的實用性，本文還同時對動物尿液樣品和豬肉樣品中的痕量甲巰咪唑的殘留進行了檢測分析。通過對檢測為空白的尿液樣品進行濃度為50，100，150μg L-1的添加，對檢測為空白的豬肉樣品進行10，20，30μg kg-1的添加，以所建立的分析方法進行檢測，結(jié)果在尿液樣品中各個添加濃度下樣品中甲巰咪唑的回收率為90.0％-95.0％，在豬肉樣品中的回收率為77.0％-89