EGFR在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及RNAi靶向作用的研究.pdf

1、分類號(hào)： 密級(jí)： U D C ： 學(xué)號(hào)：406520412361南 昌 大 學(xué) 醫(yī) 學(xué) 院 碩 士 研 究 生學(xué) 位 論 文EGFR 在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及 在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及 RNAi 靶向作用的研究 靶向作用的研究EGFR expression in ovarian epithelial tumors and RNAitargeted action research孫俊青培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院指導(dǎo)教師姓名、職

2、稱：于曉紅 主任醫(yī)師申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：病理學(xué)與病理生理學(xué)論文答辯日期： 2015 年答辯委員會(huì)主席：評(píng)閱人：2015 年 5 月 30 日摘要II摘 要 摘 要目的： 目的：1.研究表皮生長(zhǎng)因子受體（Epidermal growth factor receptor，EGFR)在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)。2.探討 RNA 干擾 EGFR 基因的表達(dá)情況及對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖情況的影響。方法： 方法：1.選擇卵巢良性腫瘤 20

3、例（良性組），卵巢交界性腫瘤 40 例（交界組），卵巢上皮性癌 40 例（惡性組）。使用免疫組化檢測(cè) EGFR 蛋白的表達(dá)情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析各組 EGFR 基因的表達(dá)。2.構(gòu)建靶向 EGFR 基因干擾 siRNA 表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染入 SKOV3 細(xì)胞中。實(shí)驗(yàn)分為三組：對(duì)照組，空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組，特異性轉(zhuǎn)染組。RT-PCR 檢測(cè) EGFR的基因表達(dá)情況。MTT 法分析細(xì)胞的增殖情況。平板集落實(shí)驗(yàn)計(jì)算抑制率。結(jié)果： 結(jié)果：1.卵巢良性腫瘤，卵巢

4、交界性腫瘤，卵巢上皮性癌中 EGFR 陽性表達(dá)率分別為 20.0％，47.5％，85.0％，惡性組陽性表達(dá)率要高過另外兩組（P0.05）。EGFR 的陽性表達(dá)率與臨床 分 期 ， 病 理 分 級(jí) 及 腫 瘤 的 大 小 有 關(guān) （ P0.05）。2.成功構(gòu)建靶向 EGFR 基因干擾 siRNA 表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染 SKOV3 細(xì)胞，RT-PCR 分析表明特異性轉(zhuǎn)染組和空白質(zhì)粒組的細(xì)胞 EGFR mRNA 表達(dá)明顯受到抑制。將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的不同

5、組的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，繪制 MTT 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，發(fā)現(xiàn)不同組細(xì)胞增殖情況存在差異，特異性轉(zhuǎn)染組的細(xì)胞生長(zhǎng)明顯低于空白質(zhì)粒組和對(duì)照組，細(xì)胞抑制率為 61.8%。平板集落實(shí)驗(yàn)中，特異轉(zhuǎn)染組中細(xì)胞集落形成抑制率為 59.9％。結(jié)論： 結(jié)論：1.EGFR 蛋白在卵巢交界性腫瘤和卵巢上皮性癌都有表達(dá)，表達(dá)逐步升高。提示 EGFR 基因可能是卵巢上皮性腫瘤形成發(fā)展的重要影響因素。2.靶向 EGFR 的基因的 RNA 干擾能降低 SKOV3 細(xì)胞 EGF