VEGF在ICP中的作用以及丹參治療作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討ICP對(duì)圍生兒的不良影響以及胎兒宮內(nèi)缺氧的可能機(jī)制,探討丹參活血化淤改善胎兒血供的可能機(jī)制.方法:臨床收集ICP和正常妊娠各30例,采集外周靜脈血,分離血清;比較新生兒體重、身長(zhǎng),胎盤重量,羊水糞染和Apgar評(píng)分情況.隨機(jī)選取正常妊娠臍帶,Jaffe法分離培養(yǎng)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,用ICP患者血清刺激培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞,模擬ICP的體內(nèi)環(huán)境,行丹參干預(yù),并與正常妊娠血清組比較,不周濃度作用不同的時(shí)間,MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力,ELISA法

2、和免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)分泌型和膜結(jié)合型VEGF蛋白表達(dá).結(jié)果:①ICP患者娩出的新生兒體重和胎盤重量明顯低于正常妊娠組,羊水糞染率明顯高于正常組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異.②ICP患者血清與HUVECs共培養(yǎng)24h,MTT法發(fā)現(xiàn)濃度在(0、5、10、15、20％)范圍內(nèi),隨著濃度的增加OD值逐漸降低,以20％濃度組OD值為最低;且OD值低于相應(yīng)濃度的正常血清組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異.③通過ELISA法發(fā)現(xiàn):同正常孕婦血清組相比,ICP患者血清組HUVECs表

3、達(dá)分泌型VEGF蛋白降低;分別刺激12h、24h、36h,20％濃度組的VEGF蛋白表達(dá)均低于10％濃度組;24h、36h的VEGF蛋白量均低于相應(yīng)濃度的12h組;20％ICP血清刺激24h,VEGF可降至最低.④與ICP血清組相比,丹參干預(yù)組隨著濃度由1mg/ml增加到8mg/ml,吸光度值和VEGF蛋白表達(dá)逐漸升高,以8mg/ml組作用最佳,與正常孕婦血清組無差別.⑤應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)方法:ICP患者血清刺激后HUVECs呈淡棕黃色著

4、色,弱陽性,著色明顯比正常孕婦血清組淺,丹參干預(yù)后,細(xì)胞著色變深,以8mg/ml組著色最深,呈強(qiáng)陽性,與正常孕婦血清刺激組HUVECs著色無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異.結(jié)論:①ICP對(duì)圍生兒產(chǎn)生不良影響.②ICP患者血清對(duì)HUVECs具有損傷作用,使細(xì)胞活力降低.丹參對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞具有保護(hù)作用.③ICP患者血清對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,可能與VEGF的分泌減少有關(guān).丹參能增加HUVECsVEGF蛋白的表達(dá).④丹參可能通過增加VEGF蛋白的表達(dá),具有活血化淤作用,改