人胎胰島細(xì)胞培養(yǎng)與凋亡相關(guān)因子檢測(cè)及意義.pdf

1、該課題在人胎胰島細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,檢測(cè)不同生長(zhǎng)時(shí)期胰島及成纖維細(xì)胞TGF-β、P21ras、c-fos的表達(dá),以期探討其與胰島細(xì)胞凋亡的關(guān)系.結(jié)論:⒈實(shí)驗(yàn)采用膠原酶消化法進(jìn)行胰島細(xì)胞消化,胰島細(xì)胞同組織塊聯(lián)合培養(yǎng)、轉(zhuǎn)皿及消化時(shí)間差法純化.DTZ染色證明上述胰島分離、純化方法較成功,且細(xì)胞至15天仍具有良好生物活性,可能與實(shí)驗(yàn)采用胰島細(xì)胞同組織塊聯(lián)合培養(yǎng)方法有關(guān),也可能是實(shí)驗(yàn)采用消化及純化方法最大限度減少胰島細(xì)胞損傷有關(guān).胰島細(xì)胞分離及培

2、養(yǎng)方法的成功為臨床應(yīng)用及進(jìn)一步研究打下基礎(chǔ).⒉P21ras在成纖維細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)期高表達(dá),提示在細(xì)胞正常生長(zhǎng)過(guò)程中,Ras可刺激成纖維細(xì)胞生長(zhǎng),可能與成纖維細(xì)胞低凋亡率、細(xì)胞可傳代數(shù)多相關(guān).而在胰島細(xì)胞各生長(zhǎng)時(shí)期弱表達(dá),無(wú)明顯變化,可能是Ras誘導(dǎo)凋亡通路未被過(guò)度激活,不發(fā)揮誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用.⒊流式細(xì)胞儀檢測(cè)胰島細(xì)胞周期多位于G1期,這和胰島TGF-β蛋白表達(dá)的免疫組化檢測(cè)結(jié)果一致.TGF-β<,1>可能是通過(guò)將胰島細(xì)胞阻滯在G1期從而