氨基肽酶N在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的:探討氨基肽酶N（aminopeptidase N，APN/CD13）對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）患者的骨破壞的影響，評(píng)價(jià)APN對(duì)RA骨破壞的預(yù)測和監(jiān)測意義。
　　方法:第一部分:將RA患者分為有骨質(zhì)破壞組和無骨質(zhì)破壞組，采用ELISA法檢測各組血清APN含量及腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）、白細(xì)胞介素17（interleukin-17，

2、IL-17）水平。通過獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)比較兩組RA患者血清APN、細(xì)胞因子水平差異，皮爾遜相關(guān)分析細(xì)胞因子和APN水平的相關(guān)性。第二部分:用流式細(xì)胞儀撿測人滑膜成纖維細(xì)胞在TNF-α、氨肽酶抑制劑bestatin的作用下的凋亡率差異；通過抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP）染色定性分析在TNF-α、bestatin誘導(dǎo)下，滑膜成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為破骨細(xì)胞的差異。
　　結(jié)果

3、:第一部分:（1）RA患者的血清APN濃度顯著高于正常對(duì)照組。（2）伴有骨質(zhì)破壞的RA患者，其血清APN濃度高于無骨質(zhì)破壞的RA患者，并且隨著RA患者雙手正位X線片報(bào)告的分級(jí)的增加，血清APN濃度增高。（3）RA患者的血清APN濃度和其DAS28、疼痛關(guān)節(jié)數(shù)、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)、ESR、ACPA、CRP的相關(guān)性均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。（4）以APN血清濃度作為RA骨破壞的預(yù)測指標(biāo)，和RF、ACPA進(jìn)行對(duì)比，APN的約登指數(shù)高于RF、ACPA的約登指數(shù)。

4、（5）RA患者的血清APN濃度和TNF-α的血清濃度存在正相關(guān)關(guān)系，而與IL-17的血清濃度不相關(guān)。第二部分:（1）在TNF-α不同濃度的干預(yù)下，滑膜成纖維細(xì)胞表面的CD13、CD14的表達(dá)并無明顯改變。（2）TNF-α干預(yù)組的滑膜成纖維細(xì)胞早期凋亡率較對(duì)照組高。bestain干預(yù)組的滑膜成纖維細(xì)胞的早期凋亡率較對(duì)照組高。（3）低濃度TNF-α組滑膜成纖維細(xì)胞的早期凋亡率高于高濃度TNF-α組。（4）TNF-α、bestatin在不同時(shí)

5、間段干預(yù)滑膜成纖維細(xì)胞后，即第40h、52h、64h后細(xì)胞早期凋亡率的變化趨勢相同。（5）bestatin增加了高濃度TNF-α的滑膜成纖維細(xì)胞的早期凋亡率，對(duì)低濃度TNF-α的凋亡誘導(dǎo)作用沒有影響。（6）對(duì)照組中，滑膜成纖維細(xì)胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色呈陰性，TNF-α干預(yù)組中，滑膜成纖維細(xì)胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色呈陽性；bestatin聯(lián)合TNF-α干預(yù)組中，滑膜成纖維細(xì)胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色呈陰性。
　　結(jié)論:（1）APN的