殼聚糖修飾TFu固體脂質(zhì)納米粒的初步研究.pdf

1、惡性腫瘤嚴(yán)重威脅人類健康，藥物治療是治療惡性腫瘤的三種基本療法之一。然而目前臨床應(yīng)用的抗腫瘤藥物多具有無(wú)組織選擇性、較高毒副作用、不穩(wěn)定性以及半衰期短等缺點(diǎn)，所以前體藥物研究受到越來(lái)越多的關(guān)注。前藥是指在體外僅有很小或沒(méi)有藥理活性，在體內(nèi)酶或非酶作用，經(jīng)生物轉(zhuǎn)化成代謝產(chǎn)物原藥后才具有藥理活性的藥物。它保持或增強(qiáng)原藥的藥效，同時(shí)又克服了原藥的缺點(diǎn)，主要為了改善藥物在體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)過(guò)程，提高對(duì)靶部位的作用選擇性，降低毒副作用，改善藥物的穩(wěn)

2、定性等。
　　 托氟啶(N3-O-toluyl-Fluorouracil，TFu)即3-鄰甲苯甲?；?氟尿嘧啶，是新一代5-氟尿嘧啶(5-Fu)前體藥物。前期研究工作表明，TFu具有明確的抗癌活性，體內(nèi)代謝穩(wěn)定性好，可選擇性地在腫瘤組織內(nèi)轉(zhuǎn)化為5-Fu而發(fā)揮藥效。但是該藥水溶性較差，不適合靜脈注射給藥，口服生物利用度也較低，限制了其臨床應(yīng)用。
　　 固體脂質(zhì)納米粒(solid lipid nanoparticles，SL

3、Ns)是由生物相容、體內(nèi)降解的天然材料如硬脂酸，脂肪醇及磷脂等作為載體形成的固體顆粒，性質(zhì)穩(wěn)定，制備較簡(jiǎn)便，具緩釋作用，適合于難溶性藥物的包裹[1]；SLNs作為一種新型的膠粒給藥系統(tǒng)，生物相容性好，易與細(xì)胞融合，具有淋巴親和性，可促進(jìn)口服藥物通過(guò)Peyer淋巴集結(jié)的吸收，提高生物利用度[2]。因此SLNs在口服納米給藥系統(tǒng)中占有重要的地位。殼聚糖是一種天然的帶正電荷的多糖，它具有親水性、生物適應(yīng)性、生物降解性和低毒、原料易得、價(jià)格低廉

4、等特點(diǎn)，還可作為吸收促進(jìn)劑，殼聚糖所帶的正電荷基團(tuán)可與細(xì)胞膜蛋白質(zhì)中帶負(fù)電荷的絲氨酸基團(tuán)相互作用，可逆性地打開緊密連接而增加旁細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)，同時(shí)由于它的生物黏附性，能通過(guò)延長(zhǎng)在吸收部位的滯留時(shí)間而提高生物利用度[3]。因此，將殼聚糖用于制得的TFu-SLNs表面修飾，可以促進(jìn)其口服吸收。
　　 本課題旨在提高TFu的水溶性，制備可方便臨床應(yīng)用的口服TFu新制劑；探索一種生物利用度較高、藥物毒性低、穩(wěn)定性好的給藥系統(tǒng)。課題以大豆卵磷脂

5、和ATO888為主要載體材料，以TFu為模型藥物，制備了TFu固體脂質(zhì)納米粒，然后用殼聚糖對(duì)其進(jìn)行表面修飾，研究了殼聚糖修飾固體脂質(zhì)納米粒的體外釋放動(dòng)力學(xué)特征以及體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)特征，評(píng)價(jià)了該固體脂質(zhì)納米粒作為脂溶性藥物載體的可行性，為固體脂質(zhì)納米粒制劑的開發(fā)應(yīng)用提供了試驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。課題主要研究方法和結(jié)果如下：
　　 1.托氟啶固體脂質(zhì)納米粒藥物含量及包封率測(cè)定方法的建立
　　 采用高速離心法[4]將載藥納米粒與游離

6、藥物分離，建立了HPLC法測(cè)定固體脂質(zhì)納米粒中TFu的含量及包封率。
　　 2.托氟啶固體脂質(zhì)納米粒的制備工藝和處方研究
　　 以TFu固體脂質(zhì)納米粒的包封率為主要考察指標(biāo)，單因素考察藥脂比、磷脂和ATO888質(zhì)量比、表面活性劑濃度、超聲時(shí)間、水浴溫度等影響因素，在此基礎(chǔ)上，采用正交設(shè)計(jì)法對(duì)TFu固體脂質(zhì)納米粒處方進(jìn)行優(yōu)化，選用藥脂比、磷脂和ATO888質(zhì)量比、有機(jī)相/水相比例為考察因素，以包封率等為指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)，得到T

7、Fu固體脂質(zhì)納米粒的優(yōu)化處方。
　　 3.托氟啶固體脂質(zhì)納米粒的理化性質(zhì)、體外釋藥動(dòng)力學(xué)
　　 以TFu溶液為對(duì)照，采用動(dòng)態(tài)膜透析法[5]分別考察TFu固體脂質(zhì)納米粒以及殼聚糖修飾TFu固體脂質(zhì)納米粒在磷酸鹽緩沖液(pH7.4)、人工胃液(pH1.2)、腸液(pH6.8)以及人工胃液轉(zhuǎn)腸液中的體外釋藥情況，結(jié)果表明兩種納米粒在各介質(zhì)中均有不同程度的緩釋作用。在人工胃液中，TFu-SLNs符合Ritger-Peppas方程

8、：lnQ=0.4226lnt+3.3221，r=0.9669；殼聚糖修飾TFu-SLNs符合Ritger-Peppas方程：lnQ=0.3996lnt+3.1651，r=0.9688。在人工腸液中，TFu-SLNs符合Weibull方程：lnQ=0.4677lnt-1.0711，r=0.9619；殼聚糖修飾TFu-SLNs符合Weibull方程：lnQ=0.3843lnt-1.3188，r=0.9610。在人工胃液轉(zhuǎn)腸液中，TFu-SL

9、Ns符合Weibull方程：lnQ=0.4883lnt-1.0976，r=0.9718；殼聚糖修飾TFu-SLNs符合Weibull方程：lnQ=0.4116lnt-1.2694，r=0.9737。TFu溶液在不同介質(zhì)中的釋放均符合一級(jí)速率方程ln(100-Q)=-0.5585t+4.037，r=0.9984；ln(100-Q)=-0.7151t+4.2232，r=0.9965和ln(100-Q)=-0.567t+4.1207，r=0.

10、9970。
　　 4.小鼠口服TFu固體脂質(zhì)納米粒體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究
　　 課題以TFu混懸液組為對(duì)照，分別考察了小鼠口服TFu固體脂質(zhì)納米粒和殼聚糖修飾固體脂質(zhì)納米粒后藥物在體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。結(jié)果表明，TFu固體脂質(zhì)納米?？梢源龠M(jìn)TFu的口服吸收，殼聚糖對(duì)納米粒進(jìn)行進(jìn)一步修飾后可以進(jìn)一步促進(jìn)TFu的口服吸收。
　　 本課題成功研制了TFu固體脂質(zhì)納米粒制劑，所采用的制備工藝簡(jiǎn)便可行，重現(xiàn)性好，包封率較高，有利