當(dāng)歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑的抗腫瘤療效及促瘤細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究.pdf

1、目的:研究當(dāng)歸貝母苦參丸單獨(dú)及聯(lián)合順鉑化療H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,并通過血清學(xué)檢測和腫瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)分子表達(dá)水平的檢測,探討當(dāng)歸貝母苦參丸抗腫瘤的細(xì)胞分子機(jī)制及對順鉑化療的減毒作用,為臨床抗腫瘤應(yīng)用提供基礎(chǔ)實驗依據(jù)。
　　方法:建立昆明小鼠H22肝癌細(xì)胞株移植瘤動物模型,隨機(jī)分為四組:模型組、順鉑對照組、當(dāng)歸貝母苦參丸組、當(dāng)歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑組,另設(shè)正?？瞻讓φ战M。給藥15天期間,觀察小鼠的生存狀態(tài),測量小鼠的體重、瘤體長

2、徑和短徑。給藥第15日下午6:00開始進(jìn)食,不禁水,次日處死小鼠。檢查外周血常規(guī);解剖取瘤體、肝臟、胸腺、脾臟,計算抑瘤率與 q值,計算腫瘤及器官指數(shù);生化方法檢測血清LDH、AST、ALT、AKP的活力及BUN和CR濃度;ELISA方法檢測腫瘤組織HIF-1α的濃度;病理檢查腫瘤、肝臟、胸腺和腎臟;免疫組織化學(xué)方法測定腫瘤組織中caspase3和突變型p53蛋白的表達(dá);RT-PCR方法檢測bax和bcl-2 mRNA的表達(dá)。
　

3、　結(jié)果:①大體觀察,當(dāng)歸貝母苦參丸組優(yōu)于模型對照組,當(dāng)歸貝母苦參丸及順鉑聯(lián)合給藥組優(yōu)于順鉑對照組。雄性小鼠當(dāng)歸貝母苦參丸組抑瘤率34.1％,聯(lián)合給藥組抑瘤率75.6%,高于順鉑對照組抑瘤率63.4%,q≈1.00;雌性小鼠當(dāng)歸貝母苦參丸組抑瘤率33.3%,聯(lián)合給藥組抑瘤率80.0%,高于順鉑對照組抑瘤率73.3%。q≈0.97。
　?、谂c模型組比較,當(dāng)歸貝母苦參丸組腫瘤組織HIF-1α顯著降低(p<0.01),突變型p53蛋白和b

4、cl-2 mRNA的表達(dá)顯著下調(diào)(p<0.01),caspase3蛋白和bax mRNA的表達(dá)顯著上調(diào)(p<0.01);
　?、叟c順鉑對照組比較,當(dāng)歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑組胸腺指數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)、caspase3蛋白和bax mRNA的表達(dá)顯著升高(p<0.01);當(dāng)歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑組腫瘤組織HIF-1α,血清LDH、AST、ALT、AKP的活性及BUN顯著降低(p<0.01),血清CR降低不顯著;當(dāng)歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑組病理檢查

5、肝小葉、腎小管損傷明顯減輕、胸腺細(xì)胞數(shù)量增多;當(dāng)歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑組突變型p53蛋白和bcl-2 mRNA的表達(dá)未顯著降低,但bax/bcl-2的比值顯著升高。
　　結(jié)論:①當(dāng)歸貝母苦參丸具有抗H22肝癌移植瘤增殖的作用,其作用與下調(diào)腫瘤組織HIF-1α、突變型p53和bcl-2基因的表達(dá),上調(diào)caspase3、bax的表達(dá)有關(guān)。②當(dāng)歸貝母苦參丸與順鉑聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同抗H22肝癌移植瘤增殖的作用,其協(xié)同機(jī)制與上調(diào)bax/bcl-