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1、目的:體外觀察黃芩苷(Baicalin)聯(lián)合順鉑(Cisplatin, CDDP)對(duì)腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞株增殖凋亡的影響。
法:(1)四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測(cè)黃芩苷與五種化療藥[順鉑(Cisplatin, CDDP),5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),阿霉素(Adriamycin,ADR),米托蒽醌(mitoxantone,NVT),吡柔比星(pirarubicin, THP)]不同濃度單獨(dú)及兩者聯(lián)合
2、作用對(duì)膠質(zhì)瘤 U87細(xì)胞增殖的影響,得到效應(yīng)最強(qiáng)的組合。(2)流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry, FCM)分析黃芩苷聯(lián)合順鉑作用于膠質(zhì)瘤 U87細(xì)胞后,對(duì)細(xì)胞周期的影響。(3)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測(cè)黃芩苷聯(lián)合順鉑作用于膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞后凋亡相關(guān)基因(bcl-2,bax,Gli)的表達(dá)情況。
結(jié)果:(1) MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示,黃芩苷與順鉑聯(lián)合用藥對(duì)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞增殖的抑制作用最強(qiáng),經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,增殖抑制
3、率差異與黃芩苷聯(lián)合順鉑有較好的劑量依賴性。(2)流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期結(jié)果顯示,G0/G1期細(xì)胞比例隨黃芩苷和順鉑聯(lián)合用藥的濃度增高而增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明聯(lián)合應(yīng)用黃芩苷和順鉑能夠有效將膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞阻滯在G0/G1期。(3)PCR結(jié)果顯示膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞經(jīng)黃芩苷、順鉑聯(lián)合用藥后凋亡促進(jìn)基因 bax的表達(dá)升高,抗凋亡基因bcl-2、Gli的表達(dá)下降。
結(jié)論:黃芩苷聯(lián)合應(yīng)用順鉑,能夠有效抑制膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞的增殖,導(dǎo)致膠
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