2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文DMT1參與β淀粉樣前體蛋白表達(dá)和Aβ分泌的機(jī)制研究姓名:鄭瑋申請學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):人體解剖與組織胚胎學(xué)指導(dǎo)教師:王占友20090301(1methyl4phenyl1,2,3,6tetrahydropyridine,MPTP)和6羥多巴胺誘導(dǎo)的PD癥狀和黑質(zhì)神經(jīng)元死亡。令人感興趣的是老齡大鼠腦內(nèi)DMTI表達(dá)呈年齡性增高趨勢;多種炎癥因子也能使DMTl在腦內(nèi)表達(dá)上調(diào),這兩種情況均是誘發(fā)AD的重要危險(xiǎn)因素。然而,

2、有關(guān)DMTl與AD發(fā)病機(jī)理的研究尚未見報(bào)道。本研究對DMTlIRE和DMTInonlRE在AD病人和APP/PSl轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)的表達(dá)變化、定位分布及與AB的相關(guān)性進(jìn)行系統(tǒng)分析,應(yīng)用RNA干擾技術(shù)(RNAinterference,RNAi)探討DMTl基因沉默阻抑APP表達(dá)和AD分泌的效果,對深入探討腦金屬代謝紊亂與AD病理生理機(jī)制具有重要意義。實(shí)驗(yàn)方法采用AD病人尸檢腦組織、雙轉(zhuǎn)染)、APP695swe基因和人早老素(presenil

3、in,PS1)突變基因的AD模型小鼠(APP/PSl小鼠)及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染APP695swe基因的SHSY5Y細(xì)胞(APPsw細(xì)胞)為研究對象,應(yīng)用免疫熒光雙標(biāo)和激光共聚焦掃描顯微技術(shù)(ConfocalLaserScanningMicroscopy,CLSM)檢測DMTl在AD病人和APP/PSl小鼠腦內(nèi)的定位分布及其與AD在老年斑內(nèi)的位置關(guān)系,應(yīng)用WesternBlot技術(shù)檢測APP/PSl小鼠大腦皮層和海馬及APPsw細(xì)胞DMTl的表達(dá)變

4、化,應(yīng)用免疫共沉淀技術(shù)(coimmunopreeipitation,coIP)檢測APP/PSl轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)DMTl和Ap的蛋白相關(guān)性,應(yīng)用RNAi技術(shù)阻抑DMTl基因在穩(wěn)定轉(zhuǎn)染APPsweDNA和空質(zhì)粒neo的SHSY5Y細(xì)胞的表達(dá),并應(yīng)用WesternBlot技術(shù)檢測RN刖對DMTl的基因沉默效果,應(yīng)用CalceinAM熒光褪色光度法、RTPCR技術(shù)、WesternBlot技術(shù)、免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)、ELISA技術(shù)、MTT技術(shù)檢測DM

5、TlRNAi對細(xì)胞鐵離子轉(zhuǎn)運(yùn)、APP表達(dá)、Ap分泌和細(xì)胞生存率的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果一、DMTl異常分布和表達(dá)參與AID發(fā)生的在體研究l、DMTl在AD病人及APP/PSl轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)的分布免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,DMTlIRE和DMTlnonIRE免疫陽性反應(yīng)產(chǎn)物均呈棕黃色,在大腦皮層及海馬內(nèi)均可見DMTl陽性的老年斑分布了斑塊大小不等,形狀為圓形或不規(guī)則形狀,邊界較清晰。高倍鏡下可見DMTIIRE和DMTlnonIRE廣泛分布到整個(gè)老年斑

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