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文檔簡(jiǎn)介
1、阿爾茨海默病是威脅老齡人群的一類(lèi)慢性進(jìn)行性中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病.為觀察阿爾茨海默病(AD)的兩大致病相關(guān)基因——淀粉樣前體蛋白(APP)基因和早老素-1(PS1)基因的高表達(dá)及其直接后果β-淀粉樣肽(A β)高度生成對(duì)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y膽堿能功能的影響,探討AD腦內(nèi)A β與膽堿能變化的聯(lián)系,以進(jìn)一步認(rèn)識(shí)AD的發(fā)病機(jī)理,本研究將攜帶野生型人APP基因的pCMV695質(zhì)粒和攜帶野生型人PS1基因的pcDNA3.1-PS1質(zhì)粒
2、分別轉(zhuǎn)染至人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y細(xì)胞中,穩(wěn)定表達(dá)后根據(jù)APP蛋白表達(dá)量、PS1蛋白表達(dá)量和Aβ生成量篩選出功能蛋白A β高表達(dá)細(xì)胞株SH-SY5Y-APP和SH-SY5Y-PS1,測(cè)定高表達(dá)細(xì)胞株的M、N-乙酰膽堿受體結(jié)合及膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)活性,觀察該細(xì)胞的膽堿能功能變化情況.實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),高表達(dá)人PS1的SH-SY5Y細(xì)胞未出現(xiàn)A β過(guò)度生成,提示野生型PS1高表達(dá)神經(jīng)細(xì)胞與突變型PS1高表達(dá)相比,作為AD的細(xì)胞模型存
3、在不足.高表達(dá)人APP的SH-SY5Y細(xì)胞A β生成量明顯增加,并有數(shù)株細(xì)胞出現(xiàn)A β過(guò)度生成.在轉(zhuǎn)染后高表達(dá)APP的SH-SY5Y-APP細(xì)胞中,與正常該細(xì)胞相比,當(dāng)A β生成量為對(duì)照的2~2.6倍(即115~150pM)時(shí),細(xì)胞M受體結(jié)合降低18.53~21.85%(P<0.05);當(dāng)A β生成量為對(duì)照的1.9~2.6倍(即108~150pM)時(shí),細(xì)胞α 7N受體結(jié)合與ChAT活性均未出現(xiàn)明顯變化(P>0.05).未觀察到明確的細(xì)胞
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