Il-8對微小凹結構中SH-SY5Y細胞VGCC功能響應的影響.pdf

1、IL8對微小凹結構中sHSY5。Y細胞VGcc功能響應的影響⑧重慶大學碩士學位論文(學術學位)學生姓名：王正偉指導教師：吳澤志教授專業(yè)：生物學學科門類：理學重慶大學生物工程學院二O一二年四月重慶大學碩士學位論文主莖塑翌——————————————————————————————————————————————————————————————————————————————一——摘要通過構建聚乳酸(PLLA)準三維微小凹結構研究SH—SY

2、5Y細胞電壓依賴鈣通道(VGCCs)的響應情況。SHSY5Y人神經(jīng)母細胞瘤細胞與微小凹結構復合后，細胞在結構上呈現(xiàn)三種不同的生長行為特點：二維(2D)生長方式；三維(3D)生長方式和近似二維(N2D)的生長方式，分別生長在結構的表面，結構的側(cè)壁以及結構底部。我們研究了微小凹結構是否有利于細胞呈三維生長以及不同生長類型在微小凹結構中的比例。白光圖片下對細胞的鋪展程度進行了分析。同時以熒光染料鈣綠1和激光共聚焦顯微技術評價SHSY5Y細胞分

3、化前后VGCC功能響應性。進而用ELISA方法研究了平面基底和微小凹結構中白細胞介素8(IL一8)的分泌情況，同時評價了外源性IL8對細胞VGCC功能響應的影響。實驗結果顯示微小凹中的細胞(N2D和3D)與平面基底上的2D細胞相比形態(tài)上更趨于圓形且鋪展面積也減少。當用50mM的高鉀刺激時，微小凹中的細胞在陽性細胞比例和VGCC反應幅度上都低于平面基底上的細胞。而且無論是鋪展面積還是VGCC反應幅度，N2D細胞的數(shù)值都介于2D細胞和3D細

4、胞之問，這表明細胞形態(tài)和VGCC功能響應之問相關聯(lián)。而IL8在微小凹結構中的分泌量高于平面基底上的分泌水平。以梯度濃度的外源性IL8作用于SHSY5Y細胞發(fā)現(xiàn)，高濃度的IL一8明顯降低了細胞VGCC的響應性。所有結果表明微小凹結構構型以及細胞的生長行為特點都影響著細胞VGCC功能的響應，而且IL8對SHSY5Y細胞在微小凹結構中功能完善扮演了重要的角色。同時本研究也為以細胞為基礎的實驗系統(tǒng)中細胞功能的構建提供了新的方法。關鍵詞：聚乳酸，