Il-8對(duì)微小凹結(jié)構(gòu)中SH-SY5Y細(xì)胞VGCC功能響應(yīng)的影響.pdf

1、IL8對(duì)微小凹結(jié)構(gòu)中sHSY5。Y細(xì)胞VGcc功能響應(yīng)的影響⑧重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文(學(xué)術(shù)學(xué)位)學(xué)生姓名：王正偉指導(dǎo)教師：吳澤志教授專業(yè)：生物學(xué)學(xué)科門類：理學(xué)重慶大學(xué)生物工程學(xué)院二O一二年四月重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文主莖塑翌——————————————————————————————————————————————————————————————————————————————一——摘要通過(guò)構(gòu)建聚乳酸(PLLA)準(zhǔn)三維微小凹結(jié)構(gòu)研究SH—SY

2、5Y細(xì)胞電壓依賴鈣通道(VGCCs)的響應(yīng)情況。SHSY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與微小凹結(jié)構(gòu)復(fù)合后，細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上呈現(xiàn)三種不同的生長(zhǎng)行為特點(diǎn)：二維(2D)生長(zhǎng)方式；三維(3D)生長(zhǎng)方式和近似二維(N2D)的生長(zhǎng)方式，分別生長(zhǎng)在結(jié)構(gòu)的表面，結(jié)構(gòu)的側(cè)壁以及結(jié)構(gòu)底部。我們研究了微小凹結(jié)構(gòu)是否有利于細(xì)胞呈三維生長(zhǎng)以及不同生長(zhǎng)類型在微小凹結(jié)構(gòu)中的比例。白光圖片下對(duì)細(xì)胞的鋪展程度進(jìn)行了分析。同時(shí)以熒光染料鈣綠1和激光共聚焦顯微技術(shù)評(píng)價(jià)SHSY5Y細(xì)胞分

3、化前后VGCC功能響應(yīng)性。進(jìn)而用ELISA方法研究了平面基底和微小凹結(jié)構(gòu)中白細(xì)胞介素8(IL一8)的分泌情況，同時(shí)評(píng)價(jià)了外源性IL8對(duì)細(xì)胞VGCC功能響應(yīng)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示微小凹中的細(xì)胞(N2D和3D)與平面基底上的2D細(xì)胞相比形態(tài)上更趨于圓形且鋪展面積也減少。當(dāng)用50mM的高鉀刺激時(shí)，微小凹中的細(xì)胞在陽(yáng)性細(xì)胞比例和VGCC反應(yīng)幅度上都低于平面基底上的細(xì)胞。而且無(wú)論是鋪展面積還是VGCC反應(yīng)幅度，N2D細(xì)胞的數(shù)值都介于2D細(xì)胞和3D細(xì)

4、胞之問(wèn)，這表明細(xì)胞形態(tài)和VGCC功能響應(yīng)之問(wèn)相關(guān)聯(lián)。而IL8在微小凹結(jié)構(gòu)中的分泌量高于平面基底上的分泌水平。以梯度濃度的外源性IL8作用于SHSY5Y細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，高濃度的IL一8明顯降低了細(xì)胞VGCC的響應(yīng)性。所有結(jié)果表明微小凹結(jié)構(gòu)構(gòu)型以及細(xì)胞的生長(zhǎng)行為特點(diǎn)都影響著細(xì)胞VGCC功能的響應(yīng)，而且IL8對(duì)SHSY5Y細(xì)胞在微小凹結(jié)構(gòu)中功能完善扮演了重要的角色。同時(shí)本研究也為以細(xì)胞為基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中細(xì)胞功能的構(gòu)建提供了新的方法。關(guān)鍵詞：聚乳酸，