卵巢癌相關基因的篩選、克隆、定位及作用機理探討.pdf

1、軍事醫(yī) 學科學院博士后出 站 報告 卵昊 癌 相關 基因的克隆、 定位 及作用機理分析英 文 縮 略 語英文縮寫A m pA PB L AS Tb yc D NADDC G HD i gDE P CDT TE BE . c o l iE DT AE S TI P T G英文名稱A m p i c i l l i nA l k a l i n e p h o s p h a t a s eB a s i c l o c a l a

2、l i g n m e n t s e a r c h t o o lb a s e p a i rc o m p l e m e n t a r y D N AD i f e r e n t i a l d i s p l a yC o m p a r a t i v e g e n o m e h y b r i d i z a t i o nD i g o x i g e n i nD i e t h y l p

3、y r o c a r b o n a t e1 , 4 - d i t h i o t h r e i t o le t h i d i u m b r o m i d eE s c h e r i c h i a c o l iE t h y l e n e d i a m i n e t e t r a a c e t i c a c i dE x p r e s s e d s e q u e n c e t a g

4、I s o p r o p y l t h i o n - ( 3 - D - T h i o g a l a c t o s i d eI S HmRNAI n s i t u h y b r i d i z a t i o nk i l o Do l t o nL u r i a - B e r t a n i me d i u mM o l o n e y m u r i n e l e u k e m i a v i r

5、 u sr e v e r s e t r a n s c r i p t a s em e s s e n g e r R N A中文名稱氨千青霉素堿性磷酸酶局部陣列分析工具堿墓對互補 D N A差異顯示比 較基因 組雜交地高 辛焦碳酸二已醋1 , 4 二硫代蘇 糖醉澳化 已 錠大腸桿菌已二胺四乙酸表達序列標簽異丙 基一 p - D 一 硫代半乳糖普原位雜交千道爾頓L B 培養(yǎng)基鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶信 使 R NA軍 事醫(yī) 學科

6、學院博士后出 站 報告 卵粱 癌相關 基因的 克隆、定 位及作用機理分 析卵粱癌相關基因的篩選、克隆、定位及作用機理探討( 摘 要)博士后合作導師岳 文李春海教授軍事醫(yī)學 科學院 附 屬醫(yī) 院 腫 瘤分 子生 物學實 驗室北京 1 0 0 8 5 0漪 。 巢 癌 是 。 前 婦 科 死 亡 率 最 高 的 腫 瘤 ， 其 五 年 、 存 率 約 為 4 6 % ， 目 前尚未發(fā)現(xiàn)在卵巢 癌的病理進程中比較敏感和特異的癌基因 和抑癌基因

7、。篩選卵巢癌的 相關 塞因并 探討其作用機制將有助于闡明卵巢 癌發(fā)生機理，并 可 以 為 臨 床 腫 瘤 的 早 期 診 斷 和 治 療 提 供 生 物 學 指 標 夕 笨 研 究 對 卵 I x - 4 組 織 和正常卵巢 組織之間的差異表達基因 進行了 一系列的篩選和鑒定， 進一步克隆獲得新的卵巢 癌候選癌基因的 c D N A全長并分析其染色 體定位和作用機理。研究主要包 括兩個部分的內(nèi)容:一、 差異顯示P C R方法篩 選卵粱

8、痊 相關 塞因 片 段 .屠 先 應 用 m R N A 差 異 顯 示 P C R 技 術 ， 克 隆 。 。 粱 癌 ( 低 分 化 腺 癌 ) 和 對 側(cè)的 正常卵巢 組織 之間 的差 異 表達 基因片 段 ( E S T s ) ， 對初步 獲 得的E S T s 進行一系 列的 鑒定: 酶切 鑒定、 重 擴增鑒定、 反向 點雜 交、 原位雜交 和N o r t h e r nb l o t 鑒定。 對經(jīng)過鑒定的基因 進行序列測

9、定并利用 N C B I 的G e n b a n k 數(shù)據(jù)庫( h t p : / / w w w . n c b i . n I m . n i h . g o v ) 對其進行比 較分 析， 以 初步明 確基因 性質(zhì)并分析其在卵巢 癌發(fā)生發(fā)展中 可能的作用 機理。結(jié)果表明， 在鑒定后得到的1 2 個差異表達的 基因片 段中， 3 個為染色 體上重復序列， 5 個為 人類未知基因片 段，4 個 為 人類已 知基因 : 泛6 A醇