水稻條紋病毒(RSV)編碼的SP蛋白的結(jié)構(gòu)與功能初探.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩74頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、水稻是目前世界人口最重要的糧食作物之一,但是,水稻因為各種各樣的病蟲害導致的產(chǎn)量下降卻屢見不鮮,其中包括嚴重影響我國水稻產(chǎn)量的一種單鏈RNA病毒----水稻條紋病毒(Rice stripe virus, RSV)。文獻報道發(fā)現(xiàn),水稻條紋病毒主要侵染水稻、煙草、甚至玉米等的葉片,使葉片出現(xiàn)枯色條紋狀病變。關于水稻條紋病毒如何作用于宿主植物,包括,病毒蛋白如何通過宿主發(fā)揮其毒害作用的機制還不清楚。因此,開展關于水稻條紋病毒蛋白與宿主水稻蛋白

2、之間的互作關系的研究具有十分重要的意義。研究發(fā)現(xiàn),水稻條紋病毒的第四條RNA鏈正向控制編碼的一種致病特異蛋白(disease-specific protein,SP)可能是參與病毒侵染植物,發(fā)揮其致病作用的一種關鍵蛋白。
  本研究以該蛋白為重點,以期解析其結(jié)構(gòu);通過尋找該蛋白作用于宿主水稻的靶標蛋白,解析互作復合體的結(jié)構(gòu),從而分析其可能的致病機理。首先,論文采用大腸桿菌表達系統(tǒng),體外表達SP蛋白,利用親和純化的方法,純化獲得該蛋

3、白,并以期得到該蛋白的晶體,然后優(yōu)化出最佳衍射數(shù)據(jù)的晶體,從而解析該蛋白的分子結(jié)構(gòu),分析其可能與宿主靶標蛋白互作的結(jié)構(gòu)域或蛋白序列。其次,以新鮮的水稻葉片為材料,進行葉片全蛋白的提取,并將SP蛋白與MBP標簽和GST標簽融合表達。最后,利用pull-down技術,將純化好的含有不同標簽的SP蛋白與水稻葉片全蛋白進行孵育后,除去非特異性結(jié)合的雜蛋白,進行SDS-PAGE檢測,銀染顯色,核磁鑒定互作蛋白的序列,并以期獲得二者互作的晶體結(jié)構(gòu),

4、分析互作的關鍵位點。結(jié)果顯示:體外表達獲得了大量的純度較高的SP蛋白;戊二醛交聯(lián)實驗標明該蛋白可能存在通過自身互作形成三聚體;報道稱發(fā)現(xiàn)SP可與水稻葉綠體光合作用復合體Ⅱ中的PsbP蛋白互作,但根據(jù)等溫滴定量熱法(ITC)測定二者互作關系,未顯示其可明顯發(fā)生互作;有報道標明,SP可能與某些短肽互作,但ITC結(jié)果未發(fā)現(xiàn)有明顯的互作關系;目前還未得到該蛋白的晶體衍射數(shù)據(jù);該蛋白與水稻葉片全蛋白的pull-down結(jié)果還未發(fā)現(xiàn)特異的互作蛋白。

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論