水稻條紋病毒侵染擬南芥的研究.pdf

1、水稻條紋病毒（ricestripvirus，RSV），纖細(xì)病毒屬（Tenuivirus）的代表種，主要由介體昆蟲灰飛虱（LaodelphaxstriatellusFallén）以持久方式經(jīng)卵傳毒，侵染水稻造成水稻條紋葉枯病，近年來(lái)在我國(guó)廣大稻區(qū)大面積爆發(fā)流行。盡管近幾十年來(lái)，科研人員對(duì)RSV的生物學(xué)和分子生物學(xué)等方面進(jìn)行了廣泛的研究，已經(jīng)鑒定了多個(gè)RSV編碼蛋白功能，但RSV致病相關(guān)基因的功能鑒定還有待進(jìn)一步研究。
　　 本文通

2、過(guò)簡(jiǎn)單的帶毒灰飛虱接種，使RSV成功侵染模式植物擬南芥，并造成植株嚴(yán)重的病害癥狀。RSV接種擬南芥植株2周后，植物葉片開始顯現(xiàn)病害癥狀:新生葉片葉脈黃化變色;1個(gè)月后，所有接種RSV擬南芥植株生長(zhǎng)緩慢，新生葉片葉脈黃化變色;45d之后，RSV侵染擬南芥植株嚴(yán)重矮化，地上部分生物量顯著少于健康植株，開花莖扭曲，高度只有健康植株的一半左右。斑點(diǎn)免疫結(jié)合印跡、RT-PCR和蛋白免疫印跡結(jié)果表明，RSV能在擬南芥植株體內(nèi)復(fù)制。這些結(jié)果表明，RS

3、V能成功侵染擬南芥，造成植株嚴(yán)重的病害癥狀，并能在擬南芥植株體內(nèi)復(fù)制。
　　 本文通過(guò)RSV接種轉(zhuǎn)基因擬南芥和擬南芥突變體，對(duì)擬南芥抗RSV的途徑進(jìn)行了初步的研究。RSV可以成功侵染不積累水楊酸(salicylicacid，SA)的轉(zhuǎn)基因擬南芥NahG植株，水楊酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)缺失突變體npr1-1擬南芥植株，以及Dicer-likeprotein缺失突變體dcl2-1、dcl3-1、dcl4-2e、dcl2-1/dcl3-1、dcl

4、2-1/dcl3-1/dcl4-2e擬南芥植株，并造成植株嚴(yán)重的病害癥狀。RSV侵染NahG與野生型植株25d，NahG植株顯著小于野生型;35d，感病NahG植株葉片停止生長(zhǎng)，大小幾乎和10d前一樣，而感病野生型植株葉片繼續(xù)生長(zhǎng);45d，感病NahG植株地上部分生物量顯著少于野生型植株。RSV侵染npr1-1和野生型植株45d，植株地上部分的生長(zhǎng)量基本一致。RSV侵染dcl2-1、dcl3-1、dcl4-2e、dcl2-1/dcl3-

5、1、dcl2-1/dcl3-1/dcl4-2e和野生型植株45d，dcl3-1單突變體、dcl2-1/dcl3-1雙突變體和dcl2-1/dcl3-1/dcl4-2e三突變體植株地上部分生物量顯著大于野生型，dcl2-1單突變體、dcl4-2e單突變體植株地上部分生物量與野生型植株地上部分生物量基本一致。這些結(jié)果表明，與野生型擬南芥相比，NahG植株對(duì)PSV更感病，而dcl3-1單突變體、dcl2-1/dcl3-1雙突變體和dcl2-1