骨髓干細(xì)胞移植治療終末期肝病的研究.pdf

1、目的及意義；原位肝移植是目前治療終末期肝病和急性肝功能衰竭的唯一有效治療手段，但肝源短缺等限制了其應(yīng)用，故干細(xì)胞移植治療的潛在臨床應(yīng)用價(jià)值越來越引起關(guān)注。本研究旨在闡明同種異體骨髓MSCs移植對(duì)肝損傷大鼠肝功改善情況及移植后MSCs體內(nèi)分布，探討肝動(dòng)脈插管自體骨髓干細(xì)胞移植治療肝硬化的安全性、可行性及療效，為終末期肝病的治療探索新的途徑。 方法；應(yīng)用2-AAF建立大鼠急性肝損傷模型，采用經(jīng)門靜脈注射途徑進(jìn)行同種異體骨髓MSCs移

2、植，檢測(cè)大鼠血清ALB、ALT及AST變化，并通過熒光標(biāo)記、免疫組化及巢式PCR等方法觀察移植細(xì)胞分布。 入選201例肝硬化患者，對(duì)其中131例進(jìn)行自體骨髓干細(xì)胞移植。骨穿采集適量骨髓，采用密度離心法分離干細(xì)胞后經(jīng)肝動(dòng)脈插管進(jìn)行移植，觀察移植后患者血清ALB、CHE、PTA、TBil和臨床癥狀的變化及患者并發(fā)癥及預(yù)后情況。 結(jié)果；2-AAF可導(dǎo)致大鼠肝組織彌漫性損傷，經(jīng)骨髓MSCs移植后3w，治療組血清ALB明顯高于對(duì)照

3、組。體內(nèi)分布研究顯示：移植后1w受體鼠肝、肺及脾臟中均可見DAPI陽(yáng)性細(xì)胞，移植后3w僅在肝損傷大鼠肝內(nèi)發(fā)現(xiàn)DAPI陽(yáng)性細(xì)胞組成的細(xì)胞簇，形態(tài)與正常肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞相近；SRY蛋白及基因檢測(cè)結(jié)果與之一致。 肝硬化患者自體骨髓干細(xì)胞移植后，無明顯不良事件發(fā)生。治療組患者血清ALB于治療后2、4、8、12及24w均明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)，Child-PughA與B級(jí)患者ALB提高程度有大于C級(jí)的趨勢(shì)。血清CHE及PTA的變化情況與

4、ALB一致。24w內(nèi)治療組臨床癥狀改善較對(duì)照組顯著(P＜0.05)。而治療后24w內(nèi)血清TBil變化與對(duì)照組相比無顯著性差異(P＞0.05)。兩組患者24w內(nèi)并發(fā)癥發(fā)生率及預(yù)后情況無顯著性差異(P＞0.05)。 結(jié)論；2-AAF可造成大鼠肝組織彌漫性損傷，經(jīng)門靜脈異體骨髓MSCs移植對(duì)2-AAF所致大鼠肝損傷有一定的治療作用。2-AAF所致大鼠肝損傷環(huán)境有助于經(jīng)門靜脈移植的骨髓MSCs的定植。體外傳代培養(yǎng)的骨髓MSCs具有免疫耐