GSK3β磷酸化介導阿托伐他汀鈣后處理減輕鏈脲佐菌素誘導的2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷.pdf

1、背景：糖尿病患者日漸增多，且糖尿病是心血管疾病的等危癥，大量流行病學研究及臨床試驗的結果顯示，糖尿病時心肌對缺血及再灌注損傷更敏感，而對常規(guī)的保護措施，如缺血預處理、缺血后處理及藥物后處理等表現(xiàn)出一定的抵抗。探索如何減輕糖尿病心肌缺血再灌注損傷是心血管領域近年來研究的熱點。
　　目的：（1）建立較為理想而穩(wěn)定的SD大鼠2型糖尿病模型；（2）觀察阿托伐他汀鈣后處理對糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注損傷的作用及不同處理組大鼠體內GSK3β磷

2、酸化情況，探討阿托伐他汀鈣后處理對糖尿病大鼠心肌保護作用的部分機制。
　　方法：（1）健康雄性 SD大鼠予高脂高糖飼料喂養(yǎng)后，腹腔注射1％S TZ，定期監(jiān)測體重和血糖，并檢測血清甘油三酯、總膽固醇；（2）將糖尿病大鼠隨機分為6組：①假手術組；②缺血再灌注組；③TDZD-8+2mg/kg阿托伐他汀鈣組；④1mg/kg阿托伐他汀鈣后處理組；⑤2mg/kg阿托伐他汀鈣后處理組；⑥DMSO組；假手術組只穿線不結扎左前降支，余5組均結扎左前

3、降支，予心肌缺血40 min，再灌注180 min處理，干預藥物于再灌注前注入。同周齡非糖尿病大鼠隨機分為2組：①假手術組；②缺血再灌注組。ELISA試劑盒測定血清cTnI、HSP70；Eva ns Blue–TTC染色法顯示心肌缺血、梗死范圍；HE染色法觀察心肌組織形態(tài)學變化；免疫組化法顯示p-GSK3β的分布情況；Western blot法測定心肌組織GSK3β，p-GSK3β，HSF-1的表達。
　　結果：（1）2型糖尿病大

4、鼠空腹血糖增高（注射STZ后1-4周均P<0.05），血甘油三酯、膽固醇增高（注射STZ后4周第P<0.05）；其體重在注射STZ后1-3周與非糖尿病大鼠相比未見明顯下降（均P>0.05），在注射后第4周體重較非糖尿病大鼠略輕（P<0.05）。（2）①糖尿病組與非糖尿病組心肌缺血范圍及梗死范圍差別無統(tǒng)計學意義（P>0.05），但HE染色顯示糖尿病組病變較重、cTnI值較高、GSK3β活性較高、而p-GSK3β較低（以上均P<0.05）；

5、②與I/R組相比，不同劑量阿托伐他汀鈣后處理組及 TDZD-8+2 mg/k g阿托伐他汀鈣組血清cTnI減低、心肌梗死范圍減小、形態(tài)學病變減輕、p-GSK3β增多（以上均P<0.05）；③相對于阿托伐他汀鈣后處理1 mg/kg組，2mg/kg組能進一步減低血清cTnI值、減小心肌梗死面積范圍、減輕形態(tài)學病變、增加p-GSK3β含量（以上均P<0.05）；④與TDZD-8+2mg/k阿托伐他汀鈣組相比，2mg/kg阿托伐他汀鈣后處理組血

6、清cTnI值、心肌梗死范圍、形態(tài)學病變、GSK3β的磷酸化水平與其差異無統(tǒng)計學意義（以上均 P>0.05）；⑤心肌細胞內HSF-1表達水平及血清HSP70的水平與心肌細胞中p-GSK3β變化一致；⑥免疫組化法檢測心肌細胞p-GSK3β提示p-GSK3β在細胞核及細胞質均有分布。
　　結論：（1）采用高脂高糖喂養(yǎng)飼料聯(lián)合腹腔注射鏈脲佐菌素的方法能夠誘導出較為穩(wěn)定的SD大鼠2型糖尿病模型。（2）①本實驗所用糖尿病大鼠模型對心肌缺血再灌