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文檔簡介
1、目的:
觀察反式脂肪酸對SD大鼠的心血管毒性作用;探討不同劑量的原花青素對反式脂肪酸致SD大鼠心血管損傷保護(hù)效果及其作用機(jī)制,為評價原花青素對反式脂肪酸致心血管損傷的保護(hù)作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:
以原花青素(PC)和反式脂肪酸(TFA)為實(shí)驗(yàn)的受試物,以6周齡健康的成年SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對象。隨機(jī)將48只SD大鼠(雌雄各半)分成6組:TFA染毒組、對照組、PC對照組以及低、中、高三個劑量的PC保護(hù)組;對照組灌
2、胃蒸餾水, TFA染毒組灌胃100mg/kg劑量的TFA, PC對照組灌胃50mg/kg劑量的PC,低(PC25mg/kg.bw)、中(PC50mg/kg.bw)、高(PC100mg/kg.bw)3個劑量的PC保護(hù)組,上午每組灌胃同劑量(100mg/kg)的TFA、下午每組分別灌胃低、中、高劑量的PC;實(shí)驗(yàn)時間為8周,隔天灌胃一次,各組動物灌胃體積為10ml/kg.bw。最后一次灌胃后,動物禁食12h,測定各組動物的體重;麻醉動物心臟取
3、血分離血清,處死動物分離臟器,測定各臟器系數(shù),內(nèi)臟脂重;全自動生化分析儀檢測各組動物血淸脂質(zhì)TC、TG、LDL、HDL的含量;試劑盒測定動物血清TNF-α、HO-1、NOS、LDH、 SOD、GSH-Px酶的活力和MDA含量;考馬斯亮藍(lán)法測其總蛋白含量;常規(guī)病理學(xué)切片,HE染色進(jìn)行主動脈和肝臟的病理形態(tài)學(xué)觀察;用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析,定量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示,組內(nèi)比較采用LSD法,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。<
4、br> 結(jié)果:
1、動物體重變化:實(shí)驗(yàn)結(jié)束時各組動物的終體重區(qū)別明顯,其中TFA染毒組大鼠體重明顯高于對照組(P<0.05);經(jīng)PC保護(hù)后其體重有隨劑量增加而下降的趨勢與TFA染毒組比較其差別均有顯著性(P<0.05)。
2、臟器系數(shù)與內(nèi)臟脂肪重量的變化:TFA染毒組肝、腎的臟器系數(shù)均分別高于對照組(P<0.05);經(jīng)PC保護(hù)后高劑量PC組動物的肝、腎臟器系數(shù)分別低于TFA染毒組(P<0.05)。TFA染毒組腎周脂
5、重、腎周脂/體比值均分別高于對照組(P<0.05),經(jīng)PC保護(hù)后高劑量PC組較TFA染毒組下降(P<0.05);各PC保護(hù)組大鼠附睪周脂重和附睪周脂重/體比值與對照組、TFA染毒組相比差異均無顯著性(P>0.05)。
3、主動脈形態(tài)學(xué)觀察鏡下可見:實(shí)驗(yàn)對照組大鼠的主動脈內(nèi)皮細(xì)胞連續(xù)、光滑且完整,表面無細(xì)胞粘附,內(nèi)膜下間隙不大,中膜的平滑肌走行較清晰,細(xì)胞排列整齊,未見增生現(xiàn)象;TFA染毒組大鼠的主動脈血管壁明顯增厚,內(nèi)膜不平整
6、,內(nèi)皮細(xì)胞缺失,且呈連續(xù)性,底層見膠原纖維,內(nèi)皮表面或內(nèi)皮下可見大量單核細(xì)胞,內(nèi)皮下間隙較寬,內(nèi)彈力板呈斷裂現(xiàn)象,中膜淺層的平滑肌細(xì)胞增生明顯,排列不整齊,平滑肌細(xì)胞有從中膜向內(nèi)膜遷移趨勢。PC保護(hù)組大鼠的主動脈內(nèi)膜較光滑,局部可見少量單核細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量減少,平滑肌細(xì)胞增生,低、中劑量保護(hù)組大鼠的主動脈形態(tài)變化相似。
4、血清脂質(zhì)的變化: TFA染毒組大鼠血清TC、TG、LDL-C含量均高于對照組(P<0.05);經(jīng)PC保
7、護(hù)后中、高劑量PC組大鼠血清TC、TG、LDL-C含量均低于TFA染毒組(P<0.05);各劑量PC保護(hù)組對大鼠血清HDL-C含量影響不明顯與TFA染毒組相比差異無顯著性(P>0.05)。
5、血清酶指標(biāo)的變化:經(jīng) PC保護(hù)后,中、高劑量 PC能降低大鼠血清中HO-1含量,高劑量 PC能降低 TNF-α含量與TFA染毒組相比差別均有顯著性(P<0.05);TFA染毒組大鼠血清中HO-1和TNF-α含量均高于對照組(P<0.05
8、)。TFA染毒組大鼠血清中NOS含量低于對照組、LDH含量高于對照組(P<0.05);高劑量PC保護(hù)組大鼠血清中NOS含量比TFA染毒組增加(P<0.05);中、高劑量PC保護(hù)組大鼠血清中LDH含量比TFA染毒組均有下降,其差別均有顯著性(P<0.05)。
6、血清脂質(zhì)過氧化指標(biāo)的變化:TFA染毒組大鼠血清中SOD和GSH-Px活力均分別低于對照組,而血清MDA含量高于對照組(P<0.05);經(jīng)PC保護(hù)后,大鼠血清中SOD和G
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