葡萄籽原花青素對DOCA-高鹽誘導(dǎo)高血壓大鼠心血管重構(gòu)的保護(hù)作用及其可能機(jī)制.pdf

1、目的:心血管重構(gòu)是高血壓最重要的靶器官損害。本文通過復(fù)制醋酸去氧皮質(zhì)酮(DOCA)-高鹽高血壓大鼠模型,觀察葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins,GSP)對DOCA-高鹽高血壓大鼠的血壓、心血管損害的影響及其可能的作用機(jī)制。
　　方法:54只♂SD大鼠,體重180-200g,隨機(jī)分為7組,包括Sham組(n=7)、UnX-Sham組(n=8)、DOCA-salt組(n=8)、GSP150 mg/

2、kg組(GSP150,n=7)、GSP240 mg/kg組(GSP240,n=8)、GSP384 mg/kg(GSP384,n=8)組和氨氯地平5 mg/kg組(ALM,n=8)。除Sham組外,其余大鼠均摘除左側(cè)腎臟,3d后皮下注射DOCA120 mg/kg,每周一次,同時(shí)飲用含1％ NaCl和0.2% KCl的高鹽水,持續(xù)4wk,復(fù)制DOCA-高鹽高血壓大鼠模型。同時(shí)各治療組大鼠分別給予不同劑量GSP或ALM灌胃,每天1次,持續(xù)4w

3、k;Sham組、UnX-Sham組和DOCA-salt組的大鼠給予蒸餾水灌胃。每周通過ALC-NIBP無創(chuàng)血壓測量分析系統(tǒng)測量大鼠尾動脈壓。4 wk后,采用BL420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)觀察大鼠血流動力學(xué)和心臟功能的變化,計(jì)算心重指數(shù)。離體血管環(huán)實(shí)驗(yàn)檢測血管內(nèi)皮依賴性舒張功能。HE染色觀察心臟和血管的病理學(xué)改變,VG染色觀察心臟纖維化程度。用比色法檢測大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量。分別用酶

4、聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和放免法(RIA)測定血清中腦鈉肽(BNP)和內(nèi)皮素-1(ET-1)含量。堿水解法測定心肌組織中羥脯氨酸(Hyp)的含量。Western-blot法檢測心肌組織中JNK和p38MAPK蛋白表達(dá)及其磷酸化水平。
　　結(jié)果:Sham組與UnX-Sham組各項(xiàng)差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。DOCA-salt組大鼠造模1wk后血壓升高到168.53±4.21 mmHg(P﹤0.01 vs Sham組),4wk后血壓升高到1

5、95.35±13.58 mmHg(P﹤0.01 vs Sham組)。給予GSP或ALM治療后,大鼠血壓均明顯下降(P﹤0.01 vs DOCA-salt組)。
　　與Sham組比較,DOCA-salt組高血壓大鼠心功能參數(shù)左心室收縮壓(LVSP)和左心室內(nèi)壓最大上升/下降速率(±dp/dtmax)明顯降低(P﹤0.01),左心室舒張末壓(LVEDP)明顯升高(P﹤0.01),且心重指數(shù)明顯增加(P﹤0.01)。HE和VG染色結(jié)果顯

6、示心肌細(xì)胞橫截面積(CSA)、心肌組織中膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)和血管周膠原容積分?jǐn)?shù)(PVCA)明顯增加(P﹤0.01)。GSP150、240、384mg/kg和ALM5mg/kg持續(xù)4 wk的治療不僅抑制了LVSP和±dp/dtmax的降低,LVEDP的升高(P﹤0.05 vs DOCA-salt group),而且劑量依賴性的降低心重指數(shù)(P<0.05 vs DOCA-salt組),改善心臟形態(tài)學(xué)的變化。
　　與Sham組大鼠比

7、較,DOCA-salt組大鼠血清中SOD活性和NO含量明顯下降,MDA含量明顯升高(P<0.01)。其胸主動脈對ACh誘導(dǎo)的血管舒張作用明顯減弱。同時(shí)血管總面積(TAA)、血管內(nèi)腔面積(LA)、血管橫截面積(CSA)、CSA/TAA、血管外半徑(AR)、血管中膜厚度(MT)和MT/LR值均明顯增大(P﹤0.05,P﹤0.01 vs Sham group)。與DOCA-salt組比較,GSP和ALM治療可明顯抑制血管重構(gòu),改善內(nèi)皮依賴性血

8、管舒張功能,并劑量依賴性的抑制血清中SOD活性的降低和MDA含量的升高(P﹤0.01)。其中GSP240、384mg/kg和ALM組的大鼠血清中 NO含量分別增加到12.30±1.92,14.92±3.91和13.53±5.11μmol/L(P﹤0.05,P﹤0.01 vs DOCA-salt組)。
　　與Sham組大鼠比較,DOCA-salt組大鼠血清中ET-1和BNP含量顯著升高(P﹤0.01),心肌組織中 Hyp含量也明顯增

9、加(P﹤0.01)。心肌組織中的JNK和p38MAPK磷酸化水平明顯增加(P﹤0.05)。與DOCA-salt組比較,GSP384mg/kg可明顯抑制 ET-1和BNP含量的升高(P﹤0.05),劑量依賴性的降低心肌組織中Hyp的含量(P﹤0.05,P﹤0.01),降低心肌組織中JNK和p38MAPK磷酸化水平(P﹤0.05)。
　　結(jié)論:GSP對DOCA-高鹽誘導(dǎo)的高血壓具有降壓作用,且GSP能改善DOCA-高鹽誘導(dǎo)的心血管重構(gòu)