膨化人參的生物學(xué)作用評價.pdf

1、目的：
　　膨化人參是以生曬參為原料，利用雙螺桿擠壓技術(shù)加工所得的新產(chǎn)品。因膨化人參系人參的新工藝制品，所以關(guān)于其成分的變化以及生物學(xué)效應(yīng)研究甚少。本研究在探討膨化人參的急性毒理學(xué)作用后，觀察了對嚙齒類小動物生長發(fā)育、神經(jīng)系統(tǒng)、運動系統(tǒng)的影響，利用常溫常壓耐缺氧實驗、負(fù)重游泳力竭實驗、在體骨骼肌收縮力學(xué)實驗、骨骼生物力學(xué)實驗和血清學(xué)檢查，初步對膨化人參的部分生物學(xué)作用做了一些研究。本研究將為膨化人參的廣泛應(yīng)用提供可靠的實驗依據(jù)，也

2、為膨化人參的進(jìn)一步研究提供新思路。
　　方法：
　　實驗對象系Spreague-Dawley清潔級雄性大鼠和昆明小鼠。
　　1.急性毒性實驗：在探討膨化人參的急性毒性實驗后，摸索了最大給藥量。大鼠18只，隨機(jī)分為2組（對照組，膨化人參組）。實驗前動物禁食不禁水16h，灌胃后禁食不禁水4h。1d內(nèi)分3次分別給予最大濃度（0.15g/ml），最大胃容量（4ml/100g)的膨化人參懸浮液，兩次灌胃間隔6h。
　　2.

3、學(xué)習(xí)記憶實驗：32只大鼠隨機(jī)分為膨化人參高、中、低劑量組和對照組，每組各8只。各給藥組給予相應(yīng)劑量（3g/kg、1.5g/kg、0.75g/kg）膨化人參懸浮液，對照組給予等容量蒸餾水，1d一次連續(xù)灌胃21d。利用Miorris水迷宮進(jìn)行定位航行實驗和空間探索能力實驗。
　　3.負(fù)重游泳力竭實驗：將32只大鼠隨機(jī)分成4組，每組8只，連續(xù)灌胃21d。膨化人參組分高、中、低劑量3個組灌胃膨化人參懸浮液（3g/kg、1.5g/kg、0.

4、75g/kg），對照組給予等容量蒸餾水。灌胃結(jié)束后，在大鼠尾部1/3-2/3處負(fù)重游泳，觀察并記錄入水后到沉入水下10s不能浮出水面的時間即游泳力竭時間。
　　4.骨骼肌在體收縮力學(xué)實驗：取16只大鼠隨機(jī)分成藥物組和對照組，分別灌胃1.5g/kg的膨化人參懸浮液和等容量蒸餾水，每天一次連續(xù)灌胃21d。應(yīng)用電生理學(xué)方法，觀察電刺激大鼠在體坐骨神經(jīng)對腓腸肌和比目魚肌單收縮的潛伏期、最大收縮幅度和1/2最大舒張幅度和強直收縮的潛伏期、最

5、大收縮幅度。
　　5.骨骼實驗：SD大鼠32只，分成膨化人參高、中、低劑量組和對照組。灌胃3g/kg、1.5g/kg、0.75g/kg的膨化人參懸浮液和等容量蒸餾水，每天一次連續(xù)灌胃21d。部分實驗中只設(shè)最佳給藥劑量組和對照組。待灌胃結(jié)束第2d，手術(shù)取材。
　?、俟趋郎L指標(biāo)：測量股骨長度、直徑、股骨/體重比、表觀骨密度。
　?、诠晒堑纳锪W(xué)實驗：用 CSS-44100型電子萬能試驗機(jī)（長春試驗機(jī)研究所有限公司中國）

6、，（載荷量程為1000N，分辨力為0.01N，橫梁位移分辨力為0.001mm）將-20℃保存的大鼠股骨常溫解凍，生理鹽水復(fù)濕，進(jìn)行三點彎曲實驗。跨距20mm，加載速度5mm/min，通過得到的測試曲線測量并計算出股骨的最大彎曲應(yīng)力、彎曲能量、彎曲彈性模量和彎曲韌性系數(shù)等生物力學(xué)參數(shù)。
　　6.常溫常壓耐缺氧實驗：將32只昆明小鼠隨機(jī)分為膨化人參高、中、低劑量組和對照組，每組8只。分別灌胃膨化人參懸濁液（1.5g/kg、0.75g/

7、kg、0.375g/kg）和蒸餾水。連續(xù)灌胃3w后，利用恒壓缺氧系統(tǒng)，觀察耐缺氧時間以及耗氧量。
　　7.血液紅細(xì)胞計數(shù)：將實驗6的動物灌胃結(jié)束后，開胸心臟采血，利用血紅細(xì)胞計數(shù)板在20倍光學(xué)顯微鏡下統(tǒng)計小鼠血紅細(xì)胞數(shù)量。
　　8.血液生化指標(biāo)測定：
　?、倏寡趸笜?biāo)：利用促凝真空采血管心臟采血，分離血清，利用酶聯(lián)法檢測SOD活性、MDA含量。
　?、诔晒巧L肽、骨鈣素：采血同抗氧化指標(biāo)測定，利用酶聯(lián)免疫法測定。

8、
　　③血鈣、血磷、堿性磷酸酶：利用促凝真空采血管心臟采血，分離血清，利用全自動生化分析儀檢測。
　　9.統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，實驗數(shù)據(jù)用Mean± SE表示。進(jìn)行單因素和雙因素方差分析和t檢驗，設(shè)定P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.最大耐受量：無法測定膨化人參的半數(shù)致死量。在探討最大耐受量時，大鼠呼吸、進(jìn)食、體毛、口鼻分泌物、狀態(tài)及體重均未見明顯異常，并且沒有發(fā)

9、生動物的死亡。膨化人參的最大給藥量是0.15g/ml×40ml/kg×3次=18g/kg，是成人每日人參最大常用量9g/60kg的120倍。
　　2.動物大體病理學(xué)改變：各組大鼠一般狀態(tài)均良好。除了膨化人參大劑量組動物進(jìn)食量減少以外其他各組動物均無異常。大體病理學(xué)檢查也未發(fā)現(xiàn)明顯異常。
　　3.動物的一般狀態(tài)：灌胃期間大鼠體重普遍增長。其中中劑量大鼠體重增長最大，但與對照組相比無明顯差異，而高劑量組大鼠與對照組相比體重增加率

10、（體重增長率=體重增加量/體重）明顯減少（P<0.05）。
　　4.血清SOD和MDA的影響：膨化人參增加大鼠血清SOD的活性，降低MDA的含量。與對照組相比均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　5.學(xué)習(xí)記憶能力的影響：
　　①定為航行能力的影響：第1和第2d的定位航行試驗中動物尋找站臺的時間，即尋找站臺潛伏期各組之間無顯著性差異。但是之后的連續(xù)三天內(nèi)，中劑量大鼠和高劑量組大鼠的尋找站臺潛伏期與對照組相比明顯縮短（P＜

11、0.05）。
　?、诳臻g探索能力的影響：撤離站臺后，膨化人參的中劑量組動物穿越站臺的次數(shù)明顯增多（P＜0.05）。
　　6.對耐缺氧能力的影響：
　?、偎劳鰰r間：膨化人參大劑量組小鼠耐缺氧時間由對照組的19.48±0.58 min增加到23.70±0.62min，具有顯著性差異（P＜0.05）。
　　②耗氧量：實驗組動物的耗氧量均有增加的趨勢，其中大劑量組的耗氧量（27.73±0.23ml）明顯高于對照組（25.

12、06±0.18ml），P值小于0.05。
　?、奂t細(xì)胞數(shù)：高劑量膨化人參對紅細(xì)胞的影響很明顯，由正常動物的8.12±0.31x1012增加到11.93±0.34x1012（P＜0.05）。
　　7.對骨骼肌收縮能力的影響：
　?、賹趋兰≈亓康挠绊懀簩嶒炗脺y定心肌和腓腸肌干重/濕重百分比的方法，觀察了膨化人參對骨骼肌和心臟重量的影響，但是均未見明顯差異（P＞0.05）。
　?、谟斡玖吣芰Φ挠绊懀号蚧藚⒅袆┝拷M

13、大鼠游泳力竭時間明顯長于對照組（P＜0.05）。
　?、墼隗w骨骼肌收縮能力的影響：膨化人參能使大鼠腓腸肌和比目魚肌的單收縮和強直收縮的潛伏期縮短，最大收縮幅度顯著增加，同時強直收縮的1/2舒張時間明顯延長，與對照組比較其差異均顯著（P＜0.05)。
　　8.對股骨生長和力學(xué)效應(yīng)的影響：
　?、俟晒巧L的影響：膨化人參高、中、低3個劑量組動物的股骨(mg)/體重(g)比均有增加傾向。分別為2.44±0.06、2.37±0

14、.05、2.33±0.05，與對照組（2.18±0.03）比較，高、中兩個劑量組的P值小于0.05，具有統(tǒng)計學(xué)意義。接著選擇效果明顯的中劑量組，觀察了大鼠股骨長度、直徑、體積和骨密度的變化。發(fā)現(xiàn)，除了骨密度以外其他各項指標(biāo)均大于對照大鼠（P＜0.05）。另外，雖然膨化人參組股骨的密度與對照組相比沒有明顯的差異（P>0.05），但是卻有提高趨勢。
　?、诠晒巧锪W(xué)效應(yīng)的影響：利用材料力學(xué)研究方法，通過三點彎曲試驗探討了股骨的生物力

15、學(xué)指標(biāo)的變化。發(fā)現(xiàn)，膨化人參中劑量組大鼠股骨最大彎曲應(yīng)力、彎曲彈性模量、彎曲能量、和彎曲韌性系數(shù)均大于對照組大鼠（P＜0.05）。提示，中劑量膨化紅參明顯提高大鼠股骨生物力學(xué)抗壓韌性。
　?、蹖ρ}、血磷和堿性磷酸酶的影響：膨化人參組的各項指標(biāo)均明顯高于對照組（P＜0.05）。
　?、軐Τ晒巧L肽（OGP）和骨鈣素（BGP）的影響：膨化人參組動物血液中OGP和BGP明顯高于對照組且有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)