新型盆底補片生物學(xué)評價的實驗研究.pdf

1、目的:檢測新型生物交聯(lián)劑京尼平對豬脫細胞膀胱(urinarybladdermatrix,UBM)體外生物學(xué)性能的影響及補片植入實驗動物家兔腹部和陰道后生物相容性和生物力學(xué)性能,為新型的盆底功能重建補片的臨床應(yīng)用提供前期試驗依據(jù)。
　　方法:
　?、俨捎帽砻婊钚詣?酶消化法對豬膀胱進行脫細胞處理后,用0.625％京尼平溶液交聯(lián)UBM72小時。通過HE染色及掃描電鏡進行組織形態(tài)觀察,并對交聯(lián)前后的脫細胞豬膀胱進行厚度、吸水性、體

2、外膠原酶降解性能以及生物力學(xué)性能檢測,以L929細胞為實驗細胞,采用MTT法評估材料的細胞毒性。
　?、趯⒓彝梅譃?組,每組15只,分別將UBM(A)、交聯(lián)型UBM(B)、聚丙烯網(wǎng)片(C)、復(fù)合交聯(lián)型UBM(D)、復(fù)合UBM(E),植入家兔腹壁,以假手術(shù)組為對照。分別于植入后1,2,4,8,12周取材,通過HE染色進行組織學(xué)觀察,采用RT-PCR技術(shù)動態(tài)檢測IFN-γ,IL-2,IL-4及IL-10mRNA的表達水平。
　　

3、③健康雌性新西蘭大白兔40只,隨機分為2組。分別將聚丙烯網(wǎng)片、京尼平交聯(lián)型UBM植入家兔的腹直肌表面及陰道直腸間隙,植入12周時取材,進行組織學(xué)反應(yīng)和生物力學(xué)性能評估。
　　結(jié)果:
　?、倬┠崞浇宦?lián)豬脫細胞膀胱后呈深藍色,保持了天然組織構(gòu)架的完整,膠原纖維更加致密,吸水性提高,力學(xué)性能良好,UBM在抗酶解實驗第7天已完全降解,交聯(lián)型UBM在第28天降解率2%。交聯(lián)前后UBM的細胞毒性為0~1級。
　　②兩復(fù)合材料組均出

4、現(xiàn)侵蝕反應(yīng),復(fù)合UBM材料組炎癥評分顯著高于其他各組(P<0.05);聚丙烯網(wǎng)片組新生血管形成、成纖維細胞增殖評分高于其他各組(P<0.05);各材料組成纖維細胞增殖顯著高于假手術(shù)組(P<0.05)。UBM材料降解速度最快,術(shù)后12周時UBM材料完全降解,而交聯(lián)型UBM材料無降解。交聯(lián)型UBM材料組的IFN-γ,IL-2,IL-4及IL-10mRNA的表達水平在每個觀察時間點上均與假手術(shù)組接近。
　?、劬郾╆幍澜M有50%出現(xiàn)侵蝕

5、反應(yīng),聚丙烯腹部組及交聯(lián)型UBM組未見侵蝕現(xiàn)象。植入陰道的聚丙烯補片有33%消失,腹部的聚丙烯補片全部可見;植入腹部的交聯(lián)型UBM補片有6%消失,陰道的交聯(lián)型UBM補片有53%消失。所有補片和腹直肌或陰道粘膜均有粘連,補片不同程度的收縮;聚丙烯補片粘連更致密收縮更明顯。
　?、軐蓚€植入部位累加統(tǒng)計,與聚丙烯比較,交聯(lián)型UBM誘導(dǎo)慢性炎癥反應(yīng)輕,炎癥評分低(P=0.021),新生血管形成(P=0.000)和成纖維細胞增殖(P=0.

6、008)評分更高。從植入部位觀察,聚丙烯陰道組比腹部組有更高的炎癥反應(yīng)評分(P=0.001),而新生血管形成和成纖維細胞增殖無顯著差異(P>0.05)。
　?、菥┠崞浇宦?lián)型UBM植入腹部和陰道12周后,力學(xué)性能無下降,而聚丙烯植入陰道后抗拉強度增強、彈性模量增加。兩種材料植入同一部位比較,腹部植入后,聚丙烯的抗拉強度、斷裂伸長率、斷裂強度均高于交聯(lián)型UBM(P<0.05),但兩者的彈性模量無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);陰道植入后,