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文檔簡介
1、溫州醫(yī)學院碩士學位論文論文題目:答辯委員會主席:答辯委員會成員:論文答辯日期:川。西、\cl2溫州醫(yī)學院碩士學位論文中文摘要目的采用人工合成的視黃醇類結合蛋白(InterphotoreceptorRetinoidBindingProtein,IRBP)和百日咳桿菌的毒素(PurifiedBordetellapertussistoxin,PTX),建立C57BL/6小鼠的自身免疫性葡萄膜炎模型(experimentalautoimmune
2、uveoretinitis,EAU),為腺苷A2A基因敲除對小鼠自身免疫性葡萄炎影響研究建立模型。方法1實驗動物:選雌性C57BL/6小鼠43只,612周齡鼠(體重20—259),分為5批次,每批均隨機選用l~2只小鼠作為陰性對照組。2視黃醇類結合蛋白(IIlte叩hotoreceptorRetinoidBindingProtein,IRBP)序列GPTHLFQPSLVLDMAKVLLD,由人工合成。3建模操作:小鼠全麻后,研究組:取I
3、RBP與完全弗氏佐劑(Freundscompleteadjuvant,rCA)按1:1體積混合得到混合液,分別在小鼠的頸部,尾根部,雙胸側部4個點,皮內注射300pg,然后腹腔注射不同劑量的純化的百日咳桿菌的毒素(PTX)。陰性對照組小鼠,同樣四個位點皮內,腹腔注射PBS。注射2周開始觀察小鼠眼底、眼前節(jié)炎癥反應并記錄。注射第21天處死小鼠,取眼球。固定、石蠟包埋、視網膜組織切片、HE染色。結果1實驗鼠34只。實驗21天時仍然存活30只
4、,眼球取樣60只眼,陰性對照9只,死亡小鼠中,PTX500ng組小鼠死亡4只,PTX200ng組350ng組小鼠死亡0只。2HE上建模成功的特征:視網膜層次紊亂、增厚,視網膜外核層和或內核層皺褶,視網膜各層炎癥細胞浸潤。3確定EAU建模成功35個眼球,占比583%。其中輕度(05分)18只,中度(12分)13只,重度(3—4分)4只。PTX500ng組18只眼,評分在05分或以上16R,成模率889%;PTX200ng寶H,成模率僅為3
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