腫瘤TK基因治療效應的光學成像監(jiān)測.pdf

1、隨著光學成像技術日新月異的發(fā)展以及在腫瘤生物學領域中的應用越來越廣泛，不僅能實現(xiàn)整體水平上治療過程的可視化監(jiān)測，更能深入到活體的細胞分子水平研究腫瘤的治療機制和轉移機制。近年來，自殺基因治療系統(tǒng)由于其靶向性強、毒副作用小，成為了抗腫瘤治療的曙光。本文應用光學成像方法，對胸苷激酶（TK）基因的腫瘤治療效應進行了系統(tǒng)的研究，同時對TK基因的腫瘤殺傷效應機制和抗腫瘤轉移作用做了一些探索性的工作。主要研究內容如下：
　　 ⑴應用腫瘤壞死

2、因子來提高TK基因對人涎腺癌細胞ACC-M的殺傷效率，并應用光學成像的方法監(jiān)測體內外治療過程。細胞水平的研究結果證實，腫瘤壞死因子確實能夠顯著提高自殺基因系統(tǒng)對ACC-M細胞的殺傷效率；在體的實驗結果不僅證實了聯(lián)合療法對腫瘤具有很好的治療效應，而且還驗證了腫瘤壞死因子具有良好的破壞腫瘤血管生成作用，從而達到協(xié)同抗腫瘤效應。
　　 ⑵通過建立穩(wěn)定表達CD3[檢測caspase-3活性的熒光共振能量轉移(FRET)探針]的ACC-M

3、細胞株(ACC-M-CD3)，和共表達胸苷激酶－綠色熒光蛋白(TK-GFP)和CD3的多色標記腫瘤細胞株ACC-M-TK-GFP-CD3，應用FRET成像技術在活細胞內對TK基因的腫瘤治療機制進行了初步研究。結果表明，TK基因的“旁觀者效應”是caspase-3非依賴性的。此外，通過對ACC-M細胞轉移性能的退化及外源基因丟失現(xiàn)象進行探討以及處理，為TK基因抗腫瘤轉移作用的建模提供了可行性方案。
　　 ⑶本研究為腫瘤TK基因治療