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文檔簡介
1、隨著光學(xué)成像技術(shù)日新月異的發(fā)展以及在腫瘤生物學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用越來越廣泛,不僅能實(shí)現(xiàn)整體水平上治療過程的可視化監(jiān)測,更能深入到活體的細(xì)胞分子水平研究腫瘤的治療機(jī)制和轉(zhuǎn)移機(jī)制。近年來,自殺基因治療系統(tǒng)由于其靶向性強(qiáng)、毒副作用小,成為了抗腫瘤治療的曙光。本文應(yīng)用光學(xué)成像方法,對胸苷激酶(TK)基因的腫瘤治療效應(yīng)進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,同時對TK基因的腫瘤殺傷效應(yīng)機(jī)制和抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用做了一些探索性的工作。主要研究內(nèi)容如下:
⑴應(yīng)用腫瘤壞死
2、因子來提高TK基因?qū)θ讼严侔┘?xì)胞ACC-M的殺傷效率,并應(yīng)用光學(xué)成像的方法監(jiān)測體內(nèi)外治療過程。細(xì)胞水平的研究結(jié)果證實(shí),腫瘤壞死因子確實(shí)能夠顯著提高自殺基因系統(tǒng)對ACC-M細(xì)胞的殺傷效率;在體的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不僅證實(shí)了聯(lián)合療法對腫瘤具有很好的治療效應(yīng),而且還驗(yàn)證了腫瘤壞死因子具有良好的破壞腫瘤血管生成作用,從而達(dá)到協(xié)同抗腫瘤效應(yīng)。
⑵通過建立穩(wěn)定表達(dá)CD3[檢測caspase-3活性的熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)探針]的ACC-M
3、細(xì)胞株(ACC-M-CD3),和共表達(dá)胸苷激酶-綠色熒光蛋白(TK-GFP)和CD3的多色標(biāo)記腫瘤細(xì)胞株ACC-M-TK-GFP-CD3,應(yīng)用FRET成像技術(shù)在活細(xì)胞內(nèi)對TK基因的腫瘤治療機(jī)制進(jìn)行了初步研究。結(jié)果表明,TK基因的“旁觀者效應(yīng)”是caspase-3非依賴性的。此外,通過對ACC-M細(xì)胞轉(zhuǎn)移性能的退化及外源基因丟失現(xiàn)象進(jìn)行探討以及處理,為TK基因抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用的建模提供了可行性方案。
⑶本研究為腫瘤TK基因治療
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