JAK2-STAT3信號通路在TAP誘導大鼠胰腺腺泡細胞釋放HMGB1中的作用.pdf

1、目的：通過研究JAK/STAT信號通路是否參與了TAP誘導大鼠胰腺腺泡細胞HMGB1的表達釋放，初步探究證實影響急性胰腺炎HMGB1表達釋放的信號通路，從而在臨床通過抑制信號通路來干擾HMGB1的表達釋放，預防炎癥加重及誘發(fā)SIRS、MODS，為臨床預防、治療SAP等重癥炎癥性疾病，減少并發(fā)癥提供新的途徑。
　　 方法：將12只SD大鼠處死后，取出胰腺分離胰腺腺泡細胞，將所得細胞懸液等分為4組，①A組：正常對照組②B組：促進組(

2、TAP組)，在胰腺腺泡細胞中加入TAP(終濃度3nmol/L)③C組：抑制組1(JAK2抑制劑-AG490組)，AG490(終濃度25μmol/L)于TAP誘導前1h加入培養(yǎng)細胞④D組：抑制組2(STAT3抑制劑-雷帕霉素)(RPM)組，RPM(終濃度40ng/ml)于TAP誘導前1h加入培養(yǎng)細胞。在3h、6h、12h、24h分別取細胞采樣。實時定量逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測HMGB1mRNA表達；蛋白印跡法(Western

3、-blot)檢測HMGB1蛋白質的表達。并用SPSS17.0軟件對各組HMGB1mRNA、蛋白的表達量作統計學分析，對各組進行作用時間與HMGB1mRNA表達的線性回歸分析。
　　 結果：與A組比較，B組各時間點HMGB1mRNA及蛋白相對表達量顯著升高(P<0.01)；與B組比較，C組12h、24h HMGB1mRNA相對表達量顯著降低(P<0.01)；12h、24h HMGB1蛋白相對表達量顯著降低(P<0.01)；與B組比

4、較，D組6h的HMGB1mRNA降低(P<0.05)，12h、24h顯著降低(P<0.01)；12h、24h HMGB1蛋白相對表達量有顯著降低(P<0.01)。且B、C、D組其HMGB1mRNA相對表達量隨時間的推移呈增高趨勢。
　　 結論：TAP可直接誘導胰腺腺泡細胞內HMGB1的釋放。AG490與雷帕霉素可抑制TAP誘導胰腺腺泡細胞HMGB1的釋放。JAK2/STAT3信號通路參與了TAP誘導胰腺腺泡細胞HMGB1的釋放。