JAK2-STAT3信號通路對非小細胞肺癌血管生成影響的研究.pdf

1、研究背景和目的：
　　 肺癌是世界上惡性腫瘤死亡率最高的疾病，其中非小細胞肺癌（NSCLC）所占比例高達85％，大部分患者診斷時已出現遠處侵襲和轉移。在腫瘤侵襲轉移的過程中，微血管的生成起到了非常重要的作用。既往研究證實腫瘤組織中JAK2/STAT3信號通路與微血管的生成密切相關，活化JAK2/STAT3通路能夠上調血管生成因子表達。但是目前并不清楚肺癌組織中該信號通路對血管生成相關因子VEGF、bFGF表達的影響及詳細的分子機

2、制。
　　 研究方法：
　　 1.應用免疫組織化學方法檢測NSCLC和正常肺組織中JAK2/STAT3信號通路和血管生成相關因子VEGF、bFGF的表達情況以及微血管密度(MVD)值，分析其與臨床資料各參數之間的相關性，以及與生存期之間的關系。
　　 2.使用不同濃度的JAK2抑制劑AG490處理人肺癌細胞A549和NCI-H292后， MTT法檢測細胞的增殖狀態(tài)；Western印跡法檢測JAK2/STAT3信號

3、通路的活化狀態(tài)；RT-PCR法檢測AG490對VEGF、bFGF mRNA的表達的影響；ELISA檢測了AG490干預后VEGF、bFGF蛋白表達變化。
　　 3. 在人肺癌細胞A549和NCI-H292中轉染STAT3 siRNA， Western印跡法檢測STAT3及pSTAT3蛋白的表達；RT-PCR法檢測轉染STAT3 siRNA 后細胞中VEGF、bFGF mRNA的表達的變化；ELISA檢測了STAT3 siRNA

4、對VEGF、bFGF蛋白表達的影響。
　　 研究結果：
　　 1.NSCLC組織中JAK2/STAT3信號通路中的相關蛋白、VEGF、bFGF的表達以及MVD值均與腫瘤組織的惡性程度相關； pSTAT3蛋白的表達與VEGF和bFGF的表達成正相關。多因素統(tǒng)計分析結果顯示MVD值可以作為判斷NSCLC患者預后的獨立因素，MVD值高的患者預后差。
　　 2.AG490處理人肺癌細胞后能夠降低JAK2和STAT3蛋白的

5、磷酸化水平，阻斷JAK2/STAT3通路的活化，VEGF和bFGF的mRNA的表達下降，并且其蛋白水平也下降。
　　 3.人肺腺癌細胞轉染STAT3 siRNA后，總的STAT3蛋白明顯減少，pSTAT3蛋白水平下降，VEGF和bFGF mRNA的表達量和蛋白水平較對照組出現明顯降低。
　　 研究結論：
　　 1.NSCLC組織的JAK2/STAT3通路的是異常持續(xù)活化的，該通路的活化與VEGF和bFGF的表達相