JAK2-STAT3信號通路介導(dǎo)粒細(xì)胞集落刺激因子影響冠狀動脈微栓塞后心肌細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、微栓塞是冠狀動脈無復(fù)流的主要原因，是急性冠脈綜合征(ACS)及經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI)中十分常見且重要的臨床病理過程[1]，減少冠狀動脈微栓塞(CME)的發(fā)生以及改善CME引起的心肌細(xì)胞損傷具有重要的臨床意義。為此，我們利用大鼠自體微栓塞模型，通過CME后心肌細(xì)胞凋亡調(diào)控基因、凋亡執(zhí)行蛋白表達(dá)的改變以及血流動力學(xué)檢測，探討(1)CME對心肌細(xì)胞凋亡及左心室功能的影響。(2)粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)對冠脈微栓塞心肌細(xì)胞凋亡的

2、影響及其細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)機(jī)制。 一、冠狀動脈微栓塞對心肌細(xì)胞凋亡及左心室功能的影響目的：探討冠脈微栓塞對大鼠心肌細(xì)胞凋亡及左心室功能的影響。方法：采用清潔級健康雄性SD大鼠56只，體重280～320g。隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組n=24)和微栓塞組(CME組n=32)；根據(jù)不同觀察時(shí)間點(diǎn)再分為術(shù)后3d(天)、7d、14d及28d四個亞組，每亞組6-8只。CME組夾閉升主動脈同時(shí)自左室腔注入自體微血栓混懸液，Sham組則注入等容量

3、的生理鹽水。采用HE及Masson染色觀察心肌組織病理學(xué)改變；Real-time PCR及免疫組化檢測心肌細(xì)胞Bcl-2、Bax、Fas、Fas-L等凋亡調(diào)控基因mRNA及其蛋白的表達(dá)；采用Western blot方法檢測Caspase3、Caspase9和裂解PARP蛋白的表達(dá)；應(yīng)用超聲心動圖及有創(chuàng)血液動力學(xué)檢測大鼠左心功能的變化。 結(jié)果：(1)HE染色顯示CME術(shù)后可見心內(nèi)膜下多中心小灶性心肌缺血、壞死伴白細(xì)胞浸潤。Mass

4、on染色顯示CME后心肌微小纖維灶形成，且多分布于心內(nèi)膜區(qū)。(2)與Sham組相比較，CME組術(shù)后Bax、Fas及Fas-L mRNA及其蛋白的表達(dá)水平明顯增高，Bc1-2/Bax的比值明顯降低(7d：0.18±0.04 vs 2.98±0.49)，術(shù)后7d達(dá)高峰(P<0.01)。(3)CME組Caspase-3、Caspase-9及裂解PARP蛋白表達(dá)明顯高于Sham組，同樣在術(shù)后7d達(dá)高峰(P<0.01)。(4)CME組凋亡指數(shù)較S