冠狀動脈微栓塞致心肌細(xì)胞凋亡及其線粒體途徑激活的研究.pdf

1、目的：探討大鼠冠狀動脈微栓塞后心肌細(xì)胞凋亡及其線粒體途徑激活的動態(tài)變化規(guī)律。 方法：夾閉主動脈，經(jīng)左心室心尖部注射42μm的微栓塞球3000個(3000個/O.1m1)，建立大鼠冠狀動脈微栓塞模型。首先按微栓塞后不同觀察時間點分為3h組、6h組、12h組、24h組、4w組；其次在各時間點觀察組中設(shè)置微栓塞組、假手術(shù)組。注入微栓塞球后存活者為微栓塞組(CME組，n=10)，左心室心尖部注入0.1ml生理鹽水者為假手術(shù)組(S組，n=

2、10)，另選取10只未經(jīng)任何處理的大鼠作為正常對照組。采用末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dLJTP切口末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)檢測心肌細(xì)胞凋亡，應(yīng)用Western blot檢測心肌細(xì)胞中凋亡線粒體途徑主要調(diào)節(jié)蛋白Caspase-9的表達(dá)，同時采用熒光檢測試劑盒檢測Caspase-9的活性。 結(jié)果：與正常對照組、S組比較，CME3h組、6h組、12h組、24h組、4w組大鼠LVEF均顯著降低(均P<0.05)；與S組比較，CME組

3、各時間點的心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)均顯著升高(均P<0.05)，CME組各時間點中，以6h組的凋亡指數(shù)最高(P<0.05)，12h組開始下降，4w組時已顯著降低；CME3h組、6h組、12h組、24h組、4w組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)和大鼠LNEF呈顯著負(fù)相關(guān)(3h組：r=-0.780，P=0.036；6h組：r=O.862，P=0.013：12h組：r=-0.811,P=0.040;24h組:r=-0.803,P=0.042;4w組:r=-0.675

4、,P=0.040)；Western blot結(jié)果顯示線粒體凋亡途徑關(guān)鍵蛋白Caspase-9的表達(dá)在6h組達(dá)高峰(P<0.05)，12h組開始下降，以后逐漸減少；Caspase-9的活性測定表明，與S組比較，CME3h組、6h組、12h組、24h組、4w組Caspase-9的活性均顯著增加(均P<0.05)，‘CME組各時間點中，以6h組心肌細(xì)胞中Caspase-9的活性程度最高；CME組各時間點之間的微梗死面積比較均無顯著差異(均P>