冠狀動(dòng)脈微栓塞致心肌細(xì)胞凋亡及其內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑激活的研究.pdf

1、目的:探討大鼠冠狀動(dòng)脈微栓塞后心肌細(xì)胞凋亡及其內(nèi)質(zhì)網(wǎng)凋亡途徑激活的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律. 方法;隨機(jī)選取成年雄性SD大鼠，夾閉升主動(dòng)脈10s，經(jīng)左心室注射42 μm微栓塞球(3000個(gè)/0.1ml)，建立大鼠冠狀動(dòng)脈微栓塞模型，設(shè)為微栓塞組(CME組)；以注射生理鹽水為假手術(shù)組(S組)。每組存活大鼠按不同觀察時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)分為3h、6h、12h、24h、4w組，每組10例。另取10只大鼠作正常對(duì)照組。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP切口

2、末端標(biāo)記技術(shù)(TLJNEL)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡，western blot檢測(cè)Caspase-12酶原及其活化產(chǎn)物Caspase-12的表達(dá)，熒光酶標(biāo)法檢測(cè)Caspase-12的活性。心臟超聲檢測(cè)左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)。 結(jié)果:(1)與正常對(duì)照組、相應(yīng)S組比較，CME組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)顯著升高(均P<0.05)，凋亡主要分布在微梗死區(qū)及其邊緣區(qū)。CME組AI在3h、6h、12h、24h、4w分別為(1.76±O.68)％

3、、(3.17±1.26)％、(1.34±0.12)％、(1.07±0.65)％、(0.30±O.13)％，3h AI開(kāi)始升高，6h AI達(dá)最高(均P<0.05)，12h AI開(kāi)始下降，4w AI已顯著下降(均P<0.05)。(2)與正常對(duì)照組、相應(yīng)S組比較，CME組Caspase-12的相對(duì)活化水平顯著升高(均P<0.05)，CME組Caspase-12的相對(duì)活化水平在3h開(kāi)始升高，6h達(dá)高峰(均P<0.05)，12h開(kāi)始下降，4w已顯

4、著下降(均P<0.01)，其隨時(shí)間變化規(guī)律與心肌細(xì)胞AI隨時(shí)間變化規(guī)律一致。CME組Caspase-12的相對(duì)活化水平與心肌細(xì)胞AI呈顯著正相關(guān)(3h組：r=0.806，P=0.024；6h組：r=0.912，P=0.010；12h組：r=0.803，P=0.028；24h組：r=0.796，P=0.033；4w組：r=0.605，P=0.046)。(3)與正常對(duì)照組、相應(yīng)S組比較，CME組LVEF顯著下降(均P<0.05)，CME組心

5、肌細(xì)胞AI與LVEF呈顯著負(fù)相關(guān)(3h組：r=-0.780,P=0.036；6h組：r=-0.862,P=0.013;12h組：r=-0.811,P=0.040;24h組：r=-0.803，P=0.042；4w組：r=-0.675，P=0.040)。 結(jié)論:冠狀動(dòng)脈微栓塞致心肌細(xì)胞凋亡顯著增加，具有動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)凋亡途徑可能參與了冠狀動(dòng)脈微栓塞致心肌細(xì)胞凋亡。冠狀動(dòng)脈微栓塞后心肌細(xì)胞凋亡可能是冠狀動(dòng)脈微栓塞致心肌損傷的重要機(jī)