幾種中藥與復(fù)方中膽汁酸的藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的:以膽汁酸單體、人工牛黃和天然牛黃兩種藥材及安宮牛黃丸與清開靈注射液兩個(gè)中成藥中的多種膽汁酸作為主要研究對象，建立靈敏、專一、簡便快速并能同時(shí)檢測生物樣品中多種膽汁酸的高效液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-MS法)，比較五種受試藥中膽汁酸的藥代動(dòng)力學(xué)過程，從藥代動(dòng)力學(xué)角度分析其藥效差異的原因，為進(jìn)一步優(yōu)化人工牛黃和方劑配伍提供依據(jù)，也為如何研究中藥和中藥方劑的藥代動(dòng)力學(xué)探索思路。 方法:小鼠血樣用微量采血法(全血20 μl)，乙腈

2、直接沉淀蛋白后用HPLC-MS法檢測全血中各種膽汁酸的濃度；組織分布研究取心、肺、腎、腦組織，勻漿離心后取上清液直接沉淀蛋白后檢測；建立大鼠原位腸灌流模型，用于分析不同因素對膽汁酸吸收的影響。 結(jié)果: 1．建立了能同時(shí)檢測11種膽汁酸的HPLC-MS檢測方法，各成分分離度好，中藥成分與內(nèi)源性成分無干擾，線性范圍為4-4000 ng·ml<'-1>，最低檢測濃度為4 ng·ml<'-1>，日問和日內(nèi)精密度均小于6.0％，方

3、法可滿足藥代動(dòng)力學(xué)研究的要求。 2．比較膽酸、異去氧膽酸、鵝去氧膽酸和去氧膽酸的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)和在組織中的分布，鵝去氧膽酸和去氧膽酸在小鼠體內(nèi)的AUC和在心臟、肺臟、腎臟、腦組織中的分布明顯高于膽酸和異去氧膽酸。其排列順序與抗肺水腫作用一致。 3．比較小鼠腹腔注射清開靈注射液和膽酸/異去氧膽酸單體時(shí)膽酸和異去氧膽酸的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)及其在主要組織心臟、肺臟、腎臟、腦中的分布，清開靈注射液中的膽酸和異去氧膽酸的AUC、MRT

4、均明顯高于膽酸和異去氧膽酸單體(P<0.05)，CL明顯低于單體(P<0.05)。清開靈注射液中膽酸和異去氧膽酸的分布明顯優(yōu)于單體膽酸和異去氧膽酸，膽酸和異去氧膽酸在組織中的濃度：腎臟>肺臟>心臟>腦，肺臟作為靶器官有較高的分布量。 4．小鼠口服給予膽汁酸單體、人工牛黃、天然牛黃、清開靈注射液和安宮牛黃丸五種受試藥后，結(jié)果顯示安宮牛黃丸中的膽汁酸在小鼠體內(nèi)的吸收最好，在肺、腦組織中的濃度最高，其次為清開靈注射液和天然牛黃，第三為

5、人工牛黃，單體膽汁酸在小鼠體內(nèi)的吸收和分布最差?；鹗笤荒c灌流模型結(jié)果與整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果相類似。 5．小鼠口服給予人工牛黃和人工牛黃加膽紅素后，比較兩組中各種膽汁酸的藥代動(dòng)力學(xué)，人工牛黃加膽紅素組中膽汁酸的AUC明顯高于人工牛黃組中，CL明顯低于人工牛黃組；組織分布結(jié)果顯示膽紅素不能促進(jìn)人工牛黃中膽汁酸在小鼠肺、腦組織中的分布。大鼠原位腸灌流模型結(jié)果也顯示相似結(jié)果，人工牛黃加膽紅素組中總膽汁酸的腸吸收明顯優(yōu)于人工牛黃組，其中甘氨

6、膽酸、?；悄懰帷⒛懰?、熊去氧膽酸、異去氧膽酸、去氧膽酸在人工牛黃加膽紅素組中腸吸收明顯優(yōu)于人工牛黃組。 6 初步探討了中藥與中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究模式。 結(jié)論: 1．建立檢測各種膽汁酸的HPLC-MS法靈敏度高，特異性好，適用于膽汁酸的體內(nèi)和體外藥代動(dòng)力學(xué)研究。 2．膽酸的同系物鵝去氧膽酸、去氧膽酸在小鼠體內(nèi)的吸收和分布優(yōu)于膽酸和異去氧膽酸，說明其藥理學(xué)結(jié)果的差異可能是由于其藥代動(dòng)力學(xué)差異引起的。