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1、摘 要目的分析角果木提取物( T a g a l s i n ) 作用前后裸鼠皮下卵巢癌移植瘤組織中B c l - 2 、p 5 3 基因表達(dá)水平的影響,探討T a g a l s i n 對(duì)卵巢癌的干預(yù)作用。方法體外培養(yǎng)人卵巢癌細(xì)胞S K O V 3 ,建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,隨機(jī)分成空白對(duì)照組、順鉑作用組、T a g a l s i n 作用組和T a g a l s i n 與順鉑聯(lián)合作用組,T a g a l s i n
2、 每天灌胃給藥1 次,腹腔注射順鉑每周給藥一次,連續(xù)3 周,空白對(duì)照組用食用油代替藥物。定期觀察各組裸鼠移植瘤生長(zhǎng)情況,免疫組化方法檢測(cè)各組B c l - 2 、p 5 3 蛋白的表達(dá);R T - P C R 檢測(cè)各組B c l 一2 、p 5 3 基因的變化。結(jié)果與空白對(duì)照組相比,順鉑作用組、T a g a l s i n 作用組及T a g a l s i n + ] l 甌鉑組的抑瘤率明顯升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P <
3、0 .0 5 ) ,其中順鉑作用組與T a g a l s i n作用組之間無差異。免疫組化結(jié)果顯示空白對(duì)照組、順鉑作用組、T a g a l s i n 作用組及T a g a l s i n + ) 頃鉑組B c l - 2 蛋白表達(dá)水平呈遞減趨勢(shì),而p 5 3 蛋白表達(dá)水平則呈遞增趨勢(shì),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < O .0 5 ) ,R T —P C R 結(jié)果顯示,藥物作用組B c l - 2 基因表達(dá)明顯低于空白對(duì)照組,
4、而P 5 3 基因表達(dá)明顯高于對(duì)照組,其中T a g a l s i n + J f 頃鉑組變化最明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < 0 .0 5 ) 。在藥物作用組中,T a g a l s i n + J I 頃鉑組變化最明顯,順鉑作用組及T a g a l s i n 實(shí)驗(yàn)組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論T a g a l s i n 可能通過調(diào)控癌基因及抑癌基因的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)抑瘤作用,將T a g a l s i n 與順鉑聯(lián)合應(yīng)
5、用可以明顯增強(qiáng)其抑瘤作用,這為臨床治療卵巢癌藥物的應(yīng)用及新藥研發(fā)提供了理論依據(jù)。關(guān)鍵詞:T a g a l s i n ;卵巢癌;P 5 3 ;B c l 一2目錄弓I 言????????????????????????????????1第一章材料與方法??????????????????????????31 .1 實(shí)驗(yàn)材料????????????????????????????31 .1 .1 動(dòng)物與試劑???????????????
6、???????????31 .1 .2 實(shí)驗(yàn)儀器???????????????????????????31 .2 實(shí)驗(yàn)方法????????????????????????????31 .2 .1 細(xì)胞培養(yǎng)???????????????????????????31 .2 .2 動(dòng)物模型的建立????????????????????????41 .2 .3 裸鼠分組及給藥????????????????????????41 .2 .4 觀察
7、指標(biāo)及抑瘤率的測(cè)定????????????????????41 .2 .5 免疫組化檢測(cè)p 5 3 、B c l - 2 蛋白的表達(dá)???????????????41 .2 .6R T - P C R 法檢測(cè)p 5 3 、B c l 一2 基因表達(dá)???????????????51 .2 .7 統(tǒng)計(jì)分析???????????????????????????7第二章結(jié)果?????????????????????????????82 .1
8、裸鼠移植瘤一般觀察???????????????????????82 .2 免疫組化檢測(cè)B c l 一2 、p 5 3 蛋白的表達(dá)???????????????82 .3R T - P C R 檢測(cè)B c l - 2 、p 5 3 m R N A 的表達(dá)????????????????9第三章討論????????????????????????????1 1第四章結(jié)論????????????????????????????1 4參考文獻(xiàn)
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