昆蟲抗菌肽對腫瘤細胞作用的效果觀察.pdf

1、腫瘤治療中的放療、化療對人體造成的傷害一直是未解決的難題，而抗菌肽的出現(xiàn)給這一領(lǐng)域帶來了一線光明。昆蟲抗菌肽能殺傷腫瘤細胞而對人體的正常細胞無毒或毒副作用甚小。本研究通過提取天然的昆蟲體內(nèi)抗菌肽，利用一些實驗方法觀察其對腫瘤細胞的作用，探討其作用機制、作用范圍和作用效果。 首先，將所選的昆蟲家蠅成蟲、幼蟲和蛹、淡色庫蚊、美洲大蠊、德國小蠊以針刺的方法感染細菌，誘導其產(chǎn)生抗菌肽，然后經(jīng)研磨、加熱、離心等方法提取出昆蟲血淋巴，再經(jīng)陽

2、離子交換柱層析等步驟提取這幾種昆蟲的抗菌肽；將所提的抗菌肽作用于大腸桿菌、金黃葡萄球菌、綠膿桿菌和白色念珠菌以觀察其抑菌效果；再將提取的抗菌肽作用于腫瘤細胞人髓樣白血病細胞(K562)、人淋巴瘤細胞株(daudi)、人食管癌細胞株(109)和人膀胱癌細胞株(T24)，用流式細胞儀觀測其抑制、殺傷腫瘤細胞的作用；然后用掃描電鏡觀察這些昆蟲抗菌肽作用的腫瘤細胞膜表面的受傷狀況；最后再用聚丙烯酰氨凝膠電泳方法分離提純這6組昆蟲抗菌肽，了解各組

3、昆蟲抗菌肽的種類、數(shù)量。 在抗腫瘤實驗中，家蠅的幼蟲和成蟲產(chǎn)生的抗菌肽效果最好，它們對4種受試的腫瘤細胞殺傷力都在86％以上；用生理鹽水代替磷酸緩沖液(PBS)提取抗菌肽可以使抗菌肽對正常人體細胞的損傷降到幾乎為零；在抗菌實驗中，家蠅幼蟲經(jīng)不同方法產(chǎn)生的抗菌肽對同種細菌的抑制效果就不同，同種細菌誘導產(chǎn)生的抗菌肽對不同細菌抑制效果也不同；掃描電鏡觀察證實了抗菌肽對腫瘤細胞的殺傷力是通過細胞膜穿孔的途徑；聚丙烯酰氨凝膠電泳顯示了這6

4、組昆蟲抗菌肽各自都由數(shù)種分子量不同的抗菌肽鏈構(gòu)成，其中家蠅幼蟲有7種抗菌肽鏈、家蠅成蟲和淡色庫蚊有5種抗菌肽鏈、家蠅蛹有4種而兩種蟑螂各有3種抗菌肽鏈。 抗腫瘤細胞的實驗表明，各種抗菌肽對腫瘤細胞的作用效果不一。有些可以很有效地殺死腫瘤細胞，如家蠅幼蟲、成蟲產(chǎn)生的抗菌肽；有些昆蟲抗菌肽，如美洲大蠊，不僅不能殺死腫瘤細胞，而且還有保護和促進其生長的作用。因此，在利用抗菌肽抑制腫瘤細胞時要對昆蟲抗菌肽進行篩選。在抗腫瘤細胞實驗中我們