NO、OPG-RANKL在大鼠運動性骨損傷發(fā)生過程中的表達及作用研究.pdf

1、研究目的：
　　過度訓(xùn)練或過度使用導(dǎo)致骨骼損傷易感性增加，進一步加劇的應(yīng)力刺激能夠產(chǎn)生運動性骨損傷。運動性骨損傷是應(yīng)力性骨折的一種，是困擾運動員和教練員的一個棘手問題，然而有關(guān)運動性骨損傷發(fā)生的具體機制仍不清楚。本實驗采用大負荷跳躍運動方式建立運動性骨損傷大鼠模型，從傳統(tǒng)骨代謝生化指標、一氧化氮和OPG、RANKL基因表達等方面入手，探討運動性骨損傷發(fā)生的分子機制。
　　研究方法：
　　48只2月齡雄性SD大鼠，隨機平

2、均分為對照組和跳躍組，每組24只。跳躍組大鼠置于自制跳躍電刺激籠內(nèi)進行大負荷跳躍訓(xùn)練，對照組安靜飼養(yǎng)，每兩周分別從兩組中取8只大鼠處死取材，6周時結(jié)束實驗。每次取材實驗時心臟取血，采用比色法檢測骨代謝生化標志物血清堿性磷酸酶（AKP）和抗酒石酸酸性磷酸酶（StrACP），采用化學(xué)法檢測NO和NOS酶活性。大鼠一側(cè)脛骨制作HE石蠟切片并染色觀察，另一測取骨干端部分骨質(zhì)使用磨骨鉗碾磨后，提取 RNA，應(yīng)用RT-PCR法檢測目的基因OPG、R

3、ANKLmRNA的表達。
　　研究結(jié)果：
　?。?）跳躍組AKP活性第2周和第4周時活性均高于對照組（p<0.05），而跳躍6周后活性極顯著高于對照組（p<0.01）。與對照組相比，跳躍2、6周組大鼠StrACP極顯著升高（p<0.01），跳躍4周組顯著升高（p<0.05），其中跳躍2、4周組升高幅度基本一致，而跳躍6周組升高幅度最大。
　　（2）跳躍2周組NO水平有升高趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05），跳躍4周組

4、NO水平顯著升高（p<0.05），而跳躍6周組NO升高幅度最大，具有非常顯著性差異（p<0.01），血清iNOS在6周時活性下降，未發(fā)現(xiàn)與NO存在相關(guān)性。
　?。?）經(jīng)過2周跳躍刺激，與對照2周組相比大鼠脛骨OPGmRNA表達量輕微下降（p<0.05），而跳躍4周時，OPGmRNA表達回升與對照組無差異，而到6周時，OPGmRNA表達明顯升高（p<0.01）。跳躍2周、4周組大鼠脛骨RANKLmRNA表達有所增加，但無顯著性差異，

5、跳躍6周組 RANKL mRNA表達量顯著增加（p<0.01）。
　?。?）跳躍組血清NO水平與OPG mRNA表達、RANKL mRNA的表達和血清AKP活性存在相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別是r=0.819（p<0.01）、0.864（p<0.01）和0.536（p<0.05）；OPG與 RANKLmRNA表達量之間存在高度相關(guān)性（r=0.947， p<0.01），OPG與AKP之間也存在相關(guān)性（r=0.615，p<0.01）；RANK