Survivin因子在膀胱癌中的表達(dá)以及熊果酸抑制膀胱癌T24細(xì)胞機(jī)制的體外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：膀胱腫瘤是泌尿外科最常見的惡性腫瘤，其臨床特點(diǎn)主要是高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)率和低度惡性。目前認(rèn)為膀胱腫瘤是一基因病，由多通路及多靶位調(diào)控。但其確切病因、發(fā)病機(jī)制及復(fù)發(fā)機(jī)制不清楚。近年來有關(guān)膀胱腫瘤發(fā)病的分子機(jī)制一直是研究的熱點(diǎn)，其中包括基因突變、原癌基因激活、抑癌基因失活及凋亡失衡等多種發(fā)病機(jī)制。Survivin(生存素)因子是近年來發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制因子，高表達(dá)于多種腫瘤組織而在正常成人組織中未見表達(dá)，其主要作用是抑制腫瘤細(xì)胞凋亡。已

2、有研究表明,survivin在許多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中起關(guān)鍵作用，是估計(jì)腫瘤預(yù)后和復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)。近年來，survivin因子在膀胱腫瘤中的表達(dá)國外已有少量研究，初步結(jié)果表明，survivin因子在膀胱腫瘤表達(dá)上調(diào)，有望成為膀胱腫瘤一種新的腫瘤診斷分子標(biāo)記物和治療的新靶點(diǎn)。 熊果酸是自然界廣泛存在的一種植物類化合物，具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，其最大的功能是抗腫瘤。體外實(shí)驗(yàn)表明熊果酸可明顯抑制人體多種腫瘤細(xì)胞的生長和繁殖。包括對腫瘤

3、細(xì)胞有明顯的細(xì)胞毒作用，可以抑制腫瘤細(xì)胞增殖，阻斷腫瘤生長因子信號通路，誘導(dǎo)凋亡，抑制抗凋亡蛋白的表達(dá)，抑制血管生成等作用。 Survivin因子在膀胱腫瘤中的表達(dá)目前已有一些研究，但熊果酸對膀胱腫瘤抑制作用國內(nèi)外尚未見報(bào)道。為此，我們在體外研究了熊果酸對膀胱腫瘤細(xì)胞的影響，并對其作用機(jī)制進(jìn)行探討。其目的在于：明確survivin因子在膀胱腫瘤中的表達(dá)情況及其與臨床病理特征的關(guān)系，體外觀察熊果酸對膀胱腫瘤細(xì)胞的抑制作用和檢測su

4、rvivin因子經(jīng)熊果酸處理后的表達(dá)變化。其意義在于：闡明survivin因子在膀胱腫瘤發(fā)病機(jī)制中的作用和熊果酸治療膀胱腫瘤的可行性。最終目的為臨床提供一種敏感性高、特異性強(qiáng)和無創(chuàng)傷的分子水平腫瘤標(biāo)志物以及提供一種有效的、無毒副作用的預(yù)防和治療膀胱腫瘤的藥物奠定理論基礎(chǔ)。 材料和方法：實(shí)驗(yàn)分兩部分：第一部分：臨床選擇54例經(jīng)臨床病理確診為膀胱癌的患者，采用免疫組化方法檢測survivin因子在膀胱癌組織中的表達(dá)情況，從中分析分析

5、survivin因子的表達(dá)情況與患者臨床病理特征的關(guān)系。第二部分：體外培養(yǎng)膀胱癌T24細(xì)胞，通過應(yīng)用不同劑量的熊果酸與膀胱癌T24細(xì)胞共培養(yǎng)，采用MTT法觀察熊果酸對膀胱癌T24細(xì)胞的抑制作用，免疫組化和WesternBlot方法檢測survivin因子表達(dá)情況的變化，分析熊果酸抑制survivin因子表達(dá)與T24細(xì)胞生存率的相關(guān)性。 結(jié)果：1.Survivin因子在膀胱腫瘤組織和細(xì)胞中高表達(dá)，其表達(dá)水平與膀胱腫瘤的臨床分期、分

6、級及預(yù)后有密切相關(guān)。 2.Survivin因子在膀胱腫瘤發(fā)病過程中取重要作用，Survivin表達(dá)增加與腫瘤進(jìn)展和復(fù)發(fā)有密切關(guān)系。 3.熊果酸能明顯抑制膀胱腫瘤細(xì)胞的生長，具有濃度和時(shí)間依賴性。4.熊果酸能明顯下調(diào)膀胱腫瘤細(xì)胞survivin因子蛋白的表達(dá)水平，具有濃度和時(shí)間依賴性。Survivin因子表達(dá)下調(diào)與腫瘤細(xì)胞存活率成正相關(guān)。 結(jié)論：1.Survivin因子是一抗凋亡因子，在膀胱腫瘤中呈陽性表達(dá)，且表達(dá)