大黃素型蒽醌化合物結(jié)構(gòu)修飾及其放射增敏活性的研究.pdf

1、目的:對大黃中主要活性成分大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素、大黃酚等羥基蒽醌類化合物進行體外放射增敏活性的研究；通過結(jié)構(gòu)修飾合成其衍生物,進一步考察其放射增敏活性和作用機制,為尋找高效低毒的腫瘤放射治療增敏藥物提供研究基礎(chǔ)。
　　 方法:MTT法測定大黃中活性成分大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素和大黃酚對宮頸癌HeLa細胞的體外生長抑制活性；集落形成實驗測定各化合物對HeLa細胞的放射增敏活性,單靶多擊模型擬合劑量存活曲線,計算放射生物學(xué)參

2、數(shù)及放射增敏比；流式細胞儀檢測蘆薈大黃素對細胞周期及凋亡的影響。基于活性測定結(jié)果,以大黃酸為先導(dǎo)化合物,將其3位羧基分別與甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸的氨基形成酰胺鍵,合成4個衍生物,采用上述方法測定其對宮頸癌HeLa細胞的體外生長抑制活性、放射增敏活性和對細胞周期的影響。
　　 結(jié)果:(1)蘆薈大黃素等羥基蒽醌類化合物對宮頸癌HeLa細胞具有明顯的濃度和時間依賴型生長抑制活性。其中蘆薈大黃素的抑制活性最強,作用24、48、

3、72h的IC50值分別為94.626、54.674、38.004μmol·L-1;大黃酸衍生物對宮頸癌HeLa細胞均具有一定程度的濃度和時間依賴型抑制活性,其中大黃酰纈氨酸活性最強,作用24、48h的IC50值分別為179.426、84.192μmol·L-1；其次是大黃酰苯丙氨酸,作用24、48、72h的IC50值分別為244.386、180.045、107.513μmol·L-1。(2)集落形成實驗結(jié)果顯示,蘆薈大黃素和大黃酸對宮頸

4、痛HeLa細胞體外放射增敏比分別為1.40、1.13；大黃酰丙氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸衍生物給藥組細胞存活曲線均低于對照組,SER(SF2)分別為1.40、1.35、1.41,顯示體外放射增敏活性。(3)流式細胞儀檢測結(jié)果顯示,蘆薈大黃素能夠產(chǎn)生明顯的細胞G1/G0期阻滯,G1/G0期細胞比例增加,S期細胞比例降低,其效應(yīng)隨藥物劑量和作用時間增加逐漸明顯；凋亡檢測中未見明顯的凋亡誘導(dǎo)作用。大黃酸衍生物對細胞周期產(chǎn)生較為明顯的影響,產(chǎn)生G2