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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:對(duì)大黃中主要活性成分大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素、大黃酚等羥基蒽醌類(lèi)化合物進(jìn)行體外放射增敏活性的研究;通過(guò)結(jié)構(gòu)修飾合成其衍生物,進(jìn)一步考察其放射增敏活性和作用機(jī)制,為尋找高效低毒的腫瘤放射治療增敏藥物提供研究基礎(chǔ)。
方法:MTT法測(cè)定大黃中活性成分大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素和大黃酚對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞的體外生長(zhǎng)抑制活性;集落形成實(shí)驗(yàn)測(cè)定各化合物對(duì)HeLa細(xì)胞的放射增敏活性,單靶多擊模型擬合劑量存活曲線,計(jì)算放射生物學(xué)參
2、數(shù)及放射增敏比;流式細(xì)胞儀檢測(cè)蘆薈大黃素對(duì)細(xì)胞周期及凋亡的影響?;诨钚詼y(cè)定結(jié)果,以大黃酸為先導(dǎo)化合物,將其3位羧基分別與甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸的氨基形成酰胺鍵,合成4個(gè)衍生物,采用上述方法測(cè)定其對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞的體外生長(zhǎng)抑制活性、放射增敏活性和對(duì)細(xì)胞周期的影響。
結(jié)果:(1)蘆薈大黃素等羥基蒽醌類(lèi)化合物對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞具有明顯的濃度和時(shí)間依賴型生長(zhǎng)抑制活性。其中蘆薈大黃素的抑制活性最強(qiáng),作用24、48、
3、72h的IC50值分別為94.626、54.674、38.004μmol·L-1;大黃酸衍生物對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞均具有一定程度的濃度和時(shí)間依賴型抑制活性,其中大黃酰纈氨酸活性最強(qiáng),作用24、48h的IC50值分別為179.426、84.192μmol·L-1;其次是大黃酰苯丙氨酸,作用24、48、72h的IC50值分別為244.386、180.045、107.513μmol·L-1。(2)集落形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,蘆薈大黃素和大黃酸對(duì)宮頸
4、痛HeLa細(xì)胞體外放射增敏比分別為1.40、1.13;大黃酰丙氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸衍生物給藥組細(xì)胞存活曲線均低于對(duì)照組,SER(SF2)分別為1.40、1.35、1.41,顯示體外放射增敏活性。(3)流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,蘆薈大黃素能夠產(chǎn)生明顯的細(xì)胞G1/G0期阻滯,G1/G0期細(xì)胞比例增加,S期細(xì)胞比例降低,其效應(yīng)隨藥物劑量和作用時(shí)間增加逐漸明顯;凋亡檢測(cè)中未見(jiàn)明顯的凋亡誘導(dǎo)作用。大黃酸衍生物對(duì)細(xì)胞周期產(chǎn)生較為明顯的影響,產(chǎn)生G2
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