調(diào)節(jié)性T細(xì)胞對大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的治療作用及機(jī)制研究.pdf

1、第一部分間充質(zhì)干細(xì)胞對大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的預(yù)防作用及其機(jī)制研究
　　實(shí)驗(yàn)?zāi)康?急性移植物抗宿主病(LTx-aGVDH)是一種肝移植后嚴(yán)重的并發(fā)癥，其發(fā)病率低(1-2％)，但是死亡率卻極高，并且缺乏有效的治療手段。我們在前期研究中已經(jīng)建立起了大鼠LTx-aGVHD模型，并發(fā)現(xiàn)其病情進(jìn)展同體內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞下降有關(guān)。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)具有免疫調(diào)節(jié)作用，近來已被用于治療骨髓移植后的GVHD。
　　材料與方法:大鼠LT

2、x-aGVHD模型建立成功后，于移植后當(dāng)天至移植后第6天連續(xù)注射供體或受體來源的MSC，通過大體表現(xiàn)及病理檢測觀察大鼠生存情況;通過免疫組化、流式細(xì)胞分析等檢測大鼠體內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞情況;并通過體外MSC同淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)研究MSC對調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用。
　　結(jié)果:注射供體或受體來源MSC的受體大鼠存活時間顯著長于對照組，且長期存活受體未表現(xiàn)出明顯的GVHD癥狀。免疫組化及流式細(xì)胞分析顯示治療組受體體內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的數(shù)量及比例顯著

3、高于對照組。體外MSC同淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)證實(shí)MSC可以誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例上調(diào)并抑制效應(yīng)性T細(xì)胞增殖。
　　結(jié)論:在大鼠肝移植模型中，注射供體或受體來源的MSC均可有效預(yù)防肝移植后急性移植物抗宿主病的發(fā)生。
　　第二部分曲古抑菌素A對大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的作用及其機(jī)制研究
　　實(shí)驗(yàn)?zāi)康?急性移植物抗宿主病(LTx-aGVHD)是肝臟移植后罕見但致命的嚴(yán)重并發(fā)癥。在前面的研究中我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)LTx-aGVHD病程的

4、進(jìn)展伴隨著調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例的降低。組蛋白去乙?；敢种苿┍话l(fā)現(xiàn)可以促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的產(chǎn)生，而如異羥戊酸（SAHA）、曲古抑菌素A(TSA)這些組蛋白去乙酰化酶抑制劑已經(jīng)用于治療自身免疫性疾病，包括骨髓移植后的移植物抗宿主病。
　　材料與方法:大鼠LTx-aGVHD模型建立成功后，于移植后第8天至第14天連續(xù)注射TSA，通過大體表現(xiàn)及病理檢測觀察大鼠生存情況，通過PCR、Western Blotting、流式細(xì)胞分析等檢測大鼠體內(nèi)調(diào)

5、節(jié)性T細(xì)胞情況;并通過體外培養(yǎng)脾臟T淋巴細(xì)胞研究TSA對LTx-aGVHD治療的作用機(jī)制。
　　結(jié)果:經(jīng)TSA治療后的大鼠均發(fā)生了典型的LTx-aGVHD癥狀，并最終死亡。經(jīng)TSA治療后的大鼠外周血單個核細(xì)胞中的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例略有上調(diào)，然而體內(nèi)外結(jié)果均證實(shí)TSA可顯著降低Foxp3蛋白及mRNA的表達(dá)水平。體外研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，TSA會損傷T細(xì)胞增殖能力以及炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生能力。
　　結(jié)論:TSA不能緩解LTx-aGVHD