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文檔簡介
1、目的:研究局灶性腦挫裂傷后大腦皮質(zhì)神經(jīng)元形態(tài)變化,探討川芎嗪、川芎嗪和尼莫地平聯(lián)合用藥對腦挫裂傷神經(jīng)細胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2mRNA表達的調(diào)控機制, 方法:采用Feeney自由落體撞擊法建立急性局灶性腦挫裂傷動物模型。取80只Wistar成年大鼠隨機分為6組。正常對照組(Normalcontrol,N);模型對照組(Modelcontrol,M);川芎嗪小劑量組(Tetramethylpyrazinecontrol,TMPI)
2、;川芎嗪大劑量組(Tetramethylpyrazinecontrol,TMPII);川芎嗪+尼莫地平小劑量組(TetramethylpyrazineandNimodipinecontrol,TANI);川芎嗪+尼莫地平大劑量組(TetramethylpyrazineandNimodipinecontrol,TANII);其中N、M組各10只,TMPI、TMPII、TANI、TANII每組各15只。TMPI組術(shù)前30min注射川芎嗪(0
3、.36mg/100g),術(shù)后8h再次注射等劑量川芎嗪,TMPII組術(shù)前、后注射等劑量川芎嗪(0.72mg/100g),TANI組術(shù)前30min注射川芎嗪(0.36mg/100g),術(shù)后8h再次注射等劑量川芎嗪及尼莫地平(0.5mg/100g),TANII組術(shù)前注射川芎嗪(0.72mg/100g),術(shù)后注射等劑量川芎嗪及尼莫地平(1.0mg/100g)。術(shù)中無菌術(shù)將實驗組大鼠右側(cè)顱頂骨造骨窗,落體750g/cm2作用力,致右側(cè)頂葉大腦皮質(zhì)
4、挫傷。N組不致傷不注藥,M組致傷不注藥。術(shù)后32h取材,常規(guī)石蠟切片和HE染色,原位雜交法檢測Bcl-2mRNA,并進行圖像分析。實驗數(shù)據(jù)進行t檢驗。 結(jié)果:1N組:大鼠腦組織冠狀切面左右對稱。大腦皮質(zhì)、胼胝體、紋狀體等結(jié)構(gòu)清晰,分界明顯。大腦皮質(zhì)神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞分布有序,雖然皮質(zhì)細胞分層界限不夠清楚,但神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞十分豐富,明顯可見。尤其是星形和錐形神經(jīng)元結(jié)構(gòu)十分清晰,它們核大而圓,異染色質(zhì)少,故胞核呈空泡狀,核仁
5、大而且嗜酸性;神經(jīng)膠質(zhì)細胞小,胞核著色較深。神經(jīng)纖維纖細,在HE染色時不夠明顯。Bcl-2mRNA原位雜交染色可見陽性細胞少,著色淺。2M組:在皮質(zhì)灶性出血和腦組織缺損區(qū)周邊有大量積液而致腦組織呈疏松網(wǎng)狀。神經(jīng)元水腫胞質(zhì)呈空泡明亮環(huán)狀,胞核異染色質(zhì)增多,嗜堿性增強,有些胞核固縮。此區(qū)細胞相對減少。灶周邊以中心區(qū)向外約0.5mm處則見組織水腫減輕,但神經(jīng)元仍有水腫現(xiàn)象,此區(qū)乃人們所說的“半暗帶”。神經(jīng)元具有可恢復(fù)性。Bcl-2mRNA陽性
6、細胞數(shù)密度較正常組增多,著色較深,灰度值降低(p均<0.01)。3TMPI、TMPII組:HE染色切片上病灶區(qū)形態(tài)和模型組無顯著差異。在“半暗帶”神經(jīng)元水腫明顯減輕。神經(jīng)元周圍水腫帶明顯縮小。Bcl-2mRNA原位雜交陽性細胞增多,著色加深,灰度值降低。4TANI、TANII組:HE染色可見病灶中心仍有明顯出血,灶周區(qū)水腫無明顯減輕,而神經(jīng)元胞質(zhì)水腫明顯好轉(zhuǎn)。Bcl-2mRNA原位雜交陽性細胞明顯增多,著色加深,灰度值降低(p均<0.0
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