人DAF、CD59基因特異表達載體的構建及其在豬血管內皮細胞表達的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、我們課題組將建立在血管內皮細胞特異表達人雙補體調節(jié)蛋白（CD59和DAF）的轉基因豬.構建攜有人ICAM-2啟動子的CD59、DAF基因的特異表達載體,以及在豬血管內皮細胞（PEC）檢測重組基因的表達,是建立此轉基因豬的上游工作.我們課題組業(yè)已完成的工作：①從人血基因組中克隆了ICAM-2啟動子片段,克隆了CD59基因第一內含子起增強子作用的DNA片段,與國外惠贈的CD59cDNA基因重組,構建了pcDNA3-En-ICAM2-CD59

2、cDNA表達載體及不含增強子pcDNA3-ICAM2-CD59cDNA表達載體.②類似上述的方法,構建了人ICAM-2作啟動子的DAF基因表達載體.pcDNA3-ICAM2-Intronl-DAFcDNA.③分別構建了檢測ICAM-2啟動子活懷及包括內含子片段在內的啟動子活性的綠色熒光蛋白報告基因.④培養(yǎng)并鑒定豬血管內皮細胞,培養(yǎng)豬耳成纖維細胞.用脂質體包裹南粒轉染方法,將上述表達載體及報告基因分別轉染豬血管內皮細胞及成纖維細胞.⑤通過

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