分支桿菌菌體裂解物增強(qiáng)雞體免疫力及其作用機(jī)理研究.pdf

1、接種卡介苗是當(dāng)今各國預(yù)防結(jié)核病最有效的手段之一。分支桿菌屬的成員如草分支桿菌、母牛分支桿菌等也被廣泛的應(yīng)用于疫苗和佐劑的制備。但是，由于是全菌制劑，菌體中對免疫功能無作用、甚至起抑制作用的成分同時(shí)存在在疫苗中，卡介苗使結(jié)核菌素的皮試出現(xiàn)陽性反應(yīng)，因而限制了它們的應(yīng)用。本文從結(jié)核分支桿菌中提取菌體蛋白和多肽，通過生物化學(xué)的方法對其進(jìn)行定量檢測。經(jīng)過動(dòng)物試驗(yàn)，探討分支桿菌菌體蛋白和多肽對雞特異性免疫和非特異性免疫的效應(yīng)，最終篩選出一種低毒、

2、高效的新型免疫增強(qiáng)劑并確定了臨床最佳用藥劑量。 利用超聲波低溫破碎技術(shù)，提取、制備結(jié)核分支桿菌中的菌體蛋白和多肽，應(yīng)用生物化學(xué)方法(lowry法)測定菌體蛋白和多肽的含量；Tricine-SDS—PAGE電泳分析菌體蛋白組分。試驗(yàn)結(jié)果表明：不同批次提取的菌體蛋白含量相對穩(wěn)定，沒有明顯差異：組分分析結(jié)果表明，菌體蛋白由多種組分構(gòu)成，分子量由66kD到6.5kD不等。 按人常用劑量，根據(jù)人/雞體表面積比，計(jì)算雞用藥量。利用所提取的結(jié)核分支桿

3、菌菌體蛋白和多肽投服試驗(yàn)雞。210只雞被均分為分支桿菌菌體蛋白高劑量組(0.9mg/只)、分支桿菌菌體蛋白中劑量組(0.45mg/只)、分支桿菌菌體蛋白低劑量組(O.225 mg/只)、透析多肽組(0.3mg/R)、未破碎全菌體組(0.3g/只)、分支桿菌菌體蛋白注射組(0.45mg/只)和對照組(生理鹽水)七個(gè)組。除注射組外，其余六組均采用口服給藥。各組試驗(yàn)雞于給藥后7d、14d、21d、28d分四次撲殺，分別檢測雞外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化