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文檔簡介
1、分支桿菌卡介苗(Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin,BCG)是長期以來一直為人們所接受的結(jié)核疫苗.為了進行分支桿菌BCG作預(yù)防和治療性DNA載體的基礎(chǔ)性研究,該實驗室設(shè)計合成了編碼口蹄疫病毒(Foot and Mouse Disease Virus)的O,A,C三型多肽疫苗的抗原表位序列作為外源序列,并在序列間設(shè)計了限制酶切位點,合計76肽,以質(zhì)粒pUC19為載體,所構(gòu)成的質(zhì)粒命名為
2、pFMDV.分支桿菌是一種生長周期很長的細菌,培養(yǎng)一批BCG需兩周以上時間.為了確保外源基因在分支桿菌中穩(wěn)定增殖,我們采用了分支桿菌整合增殖質(zhì)粒pYUB295.它以熱休克蛋白啟動子表達四環(huán)素抗性,在BCG基因組中整合而增殖.我們把546bp調(diào)控序列插入到合成的FMDV抗原表位序列的下游后,將兩者克隆到質(zhì)粒pYUB295中,再將得到的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到BCG中,即可將外源基因整合到BCG基因組中并分泌表達.該文還對質(zhì)粒pQE-FM進行了修飾,并研
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