口腔鱗癌細(xì)胞裂解物致敏的樹突狀細(xì)胞免疫活性及其體外抗腫瘤作用的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文口腔鱗癌細(xì)胞裂解物致敏的樹突狀細(xì)胞免疫活性及其體外抗腫瘤作用的研究姓名：齊艷莉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：段玉芹;許彥枝20070301中文摘要效。本研究的目的在于通過(guò)比較口腔癌患者的D C 在抗原負(fù)載前后表面分子的差異，分泌I L ．1 2 p 7 0 的能力，以及刺激同種異體T 淋巴細(xì)胞增殖的能力和殺傷實(shí)驗(yàn)等，以觀察口腔癌患者凍融抗原致敏后的D C 在體外的免疫活性和對(duì)口腔癌細(xì)胞的特異性殺傷

2、效應(yīng)，為口腔癌的生物治療提供理論依據(jù)。方法：研究對(duì)象為2 0 例經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)的口腔鱗癌患者f 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院口腔科2 0 0 5 年3 月至2 0 0 6 年1 0月住院) ，均未行過(guò)任何抗腫瘤治療，無(wú)系統(tǒng)性疾病，不處于急慢性炎癥期的口腔痛初診患者，發(fā)病部位包括舌、頰、牙齦、口底等處，臨床分期為I I I 劃和Ⅳ期，年齡在2 0 ～6 0 歲范圍內(nèi)，性別比為1 ：1 。1 ．外周血樹突狀細(xì)胞的分離培養(yǎng)無(wú)菌采集每人外周f f f

3、【( 2 0 m 1 ) ，經(jīng)密度梯度離心法分離外周血單核細(xì)胞( P B M C ) 為前體細(xì)胞。用含1 0 ％胎牛血清的R P M l l 6 4 0 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，在3 7 。C ，5 ％C 0 2 條件下孵育兩小時(shí)f 每孔終體積達(dá)3 m l 的6 孔培養(yǎng)板中) ，兩小時(shí)后，輕輕洗去非貼壁細(xì)胞，獲得黏附細(xì)胞。黏附細(xì)胞經(jīng)含l0 0 0 U ／m l r h G M ．C S F 和5 0 0 U ／m lr h l L 一4 的R

4、P M I 16 4 0 完全培養(yǎng)液誘導(dǎo)培養(yǎng)，3 7 ℃，5 ％C 0 2 孵育，隔天半量換液，于第5 天加入T N F ．a(chǎn) 2 0 0 U ／m l 以促進(jìn)其成熟。2 ．腫瘤細(xì)胞裂解物的制各及D C 的致敏于3 7 ℃，5 ％C O ，條件下以完全培基培養(yǎng)T c a 8 3 細(xì)胞，每2 —3 天換液一次，收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞并確定細(xì)胞活力在9 5 ％以上，調(diào)細(xì)胞濃度為I ×1 0 7 ／m l ，并用反復(fù)凍融法制備腫瘤裂解