負載肝癌細胞裂解物樹突狀細胞β-中心體肌動蛋白表達下調(diào)與肝癌免疫逃逸的關(guān)系.pdf

1、Y769982復旦大學博士研究生學位論文負載肝癌知恿曩解柏樹突狀細胞t3中心體肌動蛋白表逮下調(diào)與肝癌免疫逃逸的關(guān)系TherelationbetweendownregulationofBcentractinexpressionind洲ticcellspulsedwithhepatocellularcareinoma(HCc：|)lysatesandHCCimmuneescape博士麟巍生：翁永強學科、專業(yè)：外科學(肝外科)導師：湯釗猷院士

2、導師小組成員：邱雙健副教授劉銀坤教授復旦中山肝癌研究所二零零五年四月蓑埝摹勃基’蠹懟固憨中文摘要第一部分乙肝相關(guān)肝癌外周血樹突狀細胞負載腫瘤細胞裂解物前后免疫功能的變化目的：評估有乙型肝炎背景肝癌患者外周血單個核細胞來源樹突狀細胞表面分子表達及負載腫瘤抗原|ii『后的免疫功能，探討乙肝(黜v)相關(guān)肝癌患者因感染HBV導致免疫微環(huán)境改變對DC功能的影響，以及與免疫逃逸的關(guān)系。方法：分離18例乙肝相關(guān)原發(fā)性肝癌、ll例乙肝肝硬化患者和10例

3、健康獻血者外周血單個核細胞，體外培養(yǎng)加入重組入粒細胞巨噬細胞集落刺激因子和IL4誘導生成DO，以共聚焦顯微鏡和掃描電鏡觀察形態(tài)，以流式細胞儀檢測DC表面HLADR、CDla、CDS0、CD83、CD86等分子表達水平，以高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞株HCCLM6制備的細胞裂解物分別負載肝癌、肝硬化和正常人來源的DC，最后以混合淋巴細胞反應(MLR)鍘定DC負載前后刺激同種異型T淋巴細胞增殖能力，并測定MLR上清中IL12的含量。結(jié)果；正常組、肝硬化

4、組和肝癌組DC的形態(tài)之聞并無明顯差異，但肝硬化組和肝癌組HLADR、CDla、CD80和CD86等分子表達水平低于正常組(／7005)；負載腫瘤裂解物前肝硬化和肝癌組刺激同種異型T淋巴細胞增殖能力和MLR上清中IL12含量明顯低于正常組，負載腫瘤抗原后三組均有顯著提高，并以肝硬化組提高最為明顯，但IL12含量仍低予正常組。結(jié)論t乙肝相關(guān)的肝硬化積肝癌患者因感染HBV導致免疫微環(huán)境改變對DC表型和功能有抑制作用，是導致肝癌免疫逃逸的重要機

5、制；負載腫瘤裂解物可減輕免疫逃逸程度，但相比正常人DC，肝細胞癌患者DC體外負載腫瘤裂解物后仍存在表型和功能的缺陷，可能無法進行有效的腫瘤免疫治療；肝硬化患者DC仍有一定功能，可能是其尚未發(fā)展成肝癌的一個原因。第二部分樹突狀細胞負載不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細胞裂解物的蛋白質(zhì)譜變化目的：了解負載不同轉(zhuǎn)移潛能肝癌細胞裂解物和正常肝細胞裂解物后樹突狀細胞蛋白質(zhì)表達譜的差異。方法：以不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細胞株(HCCLM6高轉(zhuǎn)移、MHCC97L低轉(zhuǎn)移、