1.負載肝癌干細胞rna樹突狀細胞疫苗誘導的抗肝癌免疫應答研究;2.edil3的表達和肝癌患者預后的關系

1、中山大學博士學位論文1.負載肝癌干細胞RNA樹突狀細胞疫苗誘導的抗肝癌免疫應答研究;2.EDIL3的表達和肝癌患者預后的關系姓名：孫建聰申請學位級別：博士專業(yè)：腫瘤學指導教師：夏建川20100520中I ¨大學博。{ j 學位論文．摘要的D C 疫茁可作為一種新的靶向殺傷腫瘤干細胞的免疫治療方法。然而目前還未見應用負載肝癌干細胞R N A 的D C 疫苗用于治療肝癌的研究報道。以往的研究證實，C D l 3 3 + 肝癌細胞具

2、有較強的克隆形成能力和增殖能力，在動物體內有很強的成瘤能力?；谝陨系难芯拷Y果，我們設想負載肝癌干細胞R N A 的D C 疫苗可能能夠誘導特異性抗肝癌的免疫反應，不僅能夠殺傷普通肝癌細胞，而且能夠殺傷肝癌干細胞，達到抑制肝癌復發(fā)的目的。目 的制備負載C D l 3 3 + 肝癌干細胞R N A 的D C 疫苗，并研究其在體內外誘導抗肝癌干細胞免疫應答的作用，尋找一種增強抗肝癌樹突狀細胞疫苗的新途徑，為臨床制備更有效，更特異的D C 抗

3、肝癌疫苗奠定實驗基礎。方法l 采用免疫磁珠分選法( M A C S ) 或者流式細胞儀分選法從H u h 7 肝癌細胞系中分選純化C D l 3 3 + 肝癌干細胞，然后在體內外進行鑒定；2 提取C D l 3 3 + H u h 7 細胞的總R N A ；3 從外周血單核細胞誘導生成未成熟D C s ，同時收集T 淋巴細胞備用；4 用C D l 3 3 + H u h 7R N A 負載D C s ，采用O K ．4 3 2 刺激D

4、C s 成熟，制備負載C D l 3 3 + H u h 7 R N A 的D C 疫苗( C D l 3 3 + H u h 7 一D C s ) ；5 流式細胞儀檢測C D l 3 3 + H u h 7 ．D C s 表面共刺激分子的表達；6 利用M T S 檢測C D l 3 3 + H u h 7 一D C s 刺激自身T 淋巴細胞增殖的能力；7 用L D H 釋放法檢測C D l 3 3 + H u h 7 一D C s 誘