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1、目的:1、建立從小鼠骨髓分離、培養(yǎng)和擴(kuò)增樹突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)的方法;觀察DC分化、發(fā)育、成熟過程中形態(tài)、結(jié)構(gòu)及免疫生物學(xué)特性的變化;探討影響DC增殖、分化的有關(guān)因素.2、分離提取Hepal-6肝癌細(xì)胞膜抗原和總RNA,體外分別脈沖和轉(zhuǎn)染DC,構(gòu)建DC肝癌瘤苗;體內(nèi)、外檢測這兩種瘤苗的特異性抗肝癌效應(yīng)及抗癌免疫保護(hù)功能.結(jié)論:1、小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞在細(xì)胞因子GM-CSF或GM-CSF加IL-4誘導(dǎo)下,通過手法篩
2、選,能擴(kuò)增獲得大量功能性DC.GM-CSF是DC生長的必需因子,GM-CSF和IL-4聯(lián)合應(yīng)用可增加DC的得率,增強(qiáng)DC的免疫功能.2、肝癌細(xì)胞膜蛋白DC瘤苗和肝癌RNA轉(zhuǎn)染DC瘤苗表面免疫分子表達(dá)顯著增高,分泌IL-12能力增強(qiáng),體外能誘導(dǎo)特異性CTL反應(yīng),并能增強(qiáng)CTL分泌IFN-γ,體內(nèi)應(yīng)用有抗肝癌治療作用和免疫保護(hù)作用.3、正常肝細(xì)胞膜抗原脈沖DC及其RNA轉(zhuǎn)染DC免疫刺激功能大大降低,肝細(xì)胞及其功能活動(dòng)與肝DC免疫抑制特性及肝
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