CpG ODN對樹突狀細胞及其分泌的exosomes抗腫瘤免疫的影響.pdf

1、鄭州大學碩士學位論文CpGODN對樹突狀細胞及其分泌的exosomes抗腫瘤免疫的影響姓名：顧巧麗申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：董子明20060520鄭州大學碩上研究生畢業(yè)論立cpGoDN對樹突狀細胞及其分泌的exosomes抗腫瘤免疫的影響果具有提高作用的CpGODN。方法采取健康人臍血，等量PBs稀釋。標本使用淋巴細胞分離液進行密度梯度離心，獲得單個核細胞。在含有10％胎牛血清的RPMI—1640培養(yǎng)基中(rh

2、GM—CSF，mIL一4)誘導樹突狀細胞，置于37℃，5％c02飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。第5d用食管癌Ecal09細胞凍融抗原致敏Dc，第8d分別加上不同序列的cpGODN作為刺激物，對照組加上等量的PBS。分別收集第7d和第12d未粘附細胞，進行相關檢測。1相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)。2流式細胞儀檢測第7d和第12d樹突狀細胞表面HLADR，CD86，CD5分子表達。3通過一系列高速離心提取Dcs的亞細胞結構exosomes。利用透射電

3、鏡觀察cxosomes的形態(tài)。4四甲基偶氮嘩藍(MTT)法分別檢測Dcs以及exosomes誘導的cTL對Ecal09細胞的殺傷作用。統(tǒng)計學分析結果采用xs表示，單因素方差分析，用SPssl3O軟件檢驗，d=005為顯著性水準。結果1相差顯微鏡下，貼壁的單個核細胞加入GMcsF和IL一4培養(yǎng)24h后，細胞聚集成團狀，出現(xiàn)少量的懸浮細胞；培養(yǎng)72h后，發(fā)現(xiàn)懸浮細胞增多，體積增大；第6d可見更多的懸浮細胞；第9d可見多數(shù)細胞懸浮，形態(tài)變圓，